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Cloning, expression and characterization of SeM protein of Streptococcus equi subsp. equi and evaluation of its use as antigen in an indirect ELISA / Clonagem, expressão e caracterização de proteína SeM de Streptococcus equi subsp. equi e avaliação de sua utilização como antígeno em um ELISA indireto
Moraes, C. M; Conceição, F. R; Rocha, A. S. R; Santos Júnior, A. G; Ribas, L. M; Vargas, A. P. C; Nogueira, C. E. W; Gil-Turnes, C; Leite, F. P. L.
  • Moraes, C. M; Universidade Federal do Pará. Faculdade de Medicina Veterinária. PPGSAAM. Castanhal. BR
  • Conceição, F. R; Universidade Federal do Pará. Faculdade de Medicina Veterinária. Pelotas. BR
  • Rocha, A. S. R; Universidade Federal de Pelotas. Faculdade de Medicina Veterinária. Pelotas. BR
  • Santos Júnior, A. G; Universidade Federal de Pelotas. Faculdade de Medicina Veterinária. Pelotas. BR
  • Ribas, L. M; Universidade Federal de Pelotas. Faculdade de Medicina Veterinária. Pelotas. BR
  • Vargas, A. P. C; Universidade Federal de Santa Maria. Centro de Ciências Agrárias. Santa Maria. BR
  • Nogueira, C. E. W; Universidade Federal de Pelotas. Faculdade de Medicina Veterinária. Pelotas. BR
  • Gil-Turnes, C; Universidade Federal de Pelotas. Faculdade de Medicina Veterinária. Pelotas. BR
  • Leite, F. P. L; Universidade Federal de Pelotas. Faculdade de Medicina Veterinária. Pelotas. BR
Arq. bras. med. vet. zootec ; 66(4): 1015-1022, 08/2014. graf
Article in English | LILACS | ID: lil-722582
ABSTRACT
Strangles is an economically important horse disease caused by Streptococcus equi subsp. equi. The diagnosis can be confirmed either directly by bacterial isolation and PCR or by ELISA, which is an indirect method based on the detection of serum antibodies. The aim of this study was to clone, express and characterize the SeM protein of Streptococcus equi subsp. equi, evaluate its use as antigen in indirect ELISA and determine its performance to distinguish sera of negative, vaccinated and positive animals. This was initially performed by cloning the gene encoding the SeM protein and its expression in Escherichia coli. Subsequently, the protein produced was characterized and used as antigen in ELISA. Serum samples for evaluation were taken from 40 negative foals, 46 horses vaccinated with a commercial vaccine against strangles and 46 horses diagnosed with the disease. The test showed high specificity and sensitivity, allowing discrimination between negative and positive, positive and vaccinated animals, and vaccinated animals and negative sera. Thus, it was concluded that the protein produced rSeM, which can be used as antigen for disease diagnosis, and the described ELISA might be helpful to evaluate the immune status of the herd...
RESUMO
A adenite equina é uma enfermidade economicamente importante de equinos, causada por Streptococcus equi subsp. equi. Seu diagnóstico pode ser confirmado de forma direta, por meio de isolamento bacteriano e de PCR, ou de forma indireta, por meio de ELISA, método baseado na detecção de anticorpos séricos. O objetivo deste estudo foi clonar, expressar e caracterizar a proteína SeM de Streptococcus equi subsp. equi, avaliar sua utilização como antígeno em um ELISA indireto e determinar a capacidade do teste de distinguir soros de animais negativos, vacinados e positivos. Para tal, foi inicialmente realizada a clonagem do gene que codifica para a proteína SeM e sua expressão em Escherichia coli. Posteriormente, a proteína produzida foi caracterizada e utilizada como antígeno em um teste de ELISA indireto. Para avaliação do teste, foram utilizadas amostras de soro de 40 potros negativos, de 46 equinos vacinados com uma vacina comercial contra adenite equina e de 46 equinos com diagnóstico da doença. O teste demonstrou alta sensibilidade e especificidade, permitindo discriminar entre soros negativos e positivos, positivos e de animais vacinados, e negativos e de animais vacinados. Assim, conclui-se que a proteína rSeM produzida pode ser usada como antígeno para o diagnóstico da enfermidade e que o ELISA descrito pode ser útil para avaliar o estado imunológico do rebanho...
Subject(s)


Full text: Available Index: LILACS (Americas) Main subject: Protein Biosynthesis / Enzyme-Linked Immunosorbent Assay / Streptococcus equi / Horses / Lymphadenitis Limits: Animals Language: English Journal: Arq. bras. med. vet. zootec Journal subject: Veterinary Medicine Year: 2014 Type: Article Affiliation country: Brazil Institution/Affiliation country: Universidade Federal de Pelotas/BR / Universidade Federal de Santa Maria/BR / Universidade Federal do Pará/BR

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Full text: Available Index: LILACS (Americas) Main subject: Protein Biosynthesis / Enzyme-Linked Immunosorbent Assay / Streptococcus equi / Horses / Lymphadenitis Limits: Animals Language: English Journal: Arq. bras. med. vet. zootec Journal subject: Veterinary Medicine Year: 2014 Type: Article Affiliation country: Brazil Institution/Affiliation country: Universidade Federal de Pelotas/BR / Universidade Federal de Santa Maria/BR / Universidade Federal do Pará/BR