Estrogen receptors in immunohistochemically stained slides: comparing subjective and computerized evaluation methods / Receptores de estrógeno en cortes teñidos inmunohistoquímicamente: comparación de métodos de evaluación subjetivos y computarizados

ABSTRACT

Immunohistochemistry is a specific and sensitive staining method for detection of several proteins. One important function of this method is to help us on the diagnosis of the presence of specific receptors as the estrogen receptors. The aim of this study was to compare two different methods to evaluate immunohistochemical staining intensity to detect the presence of ER in the nasal mucosa tissue one using a digital system and the other through conventional direct microscopy observation. Sixty two stained samples were observed and analyzed under optic microscopy by three specialized professionals, who have graded intensity from absent, mild, moderate and intense staining. Afterwards, an objective measurement was obtained by a relative optical density (ROD) reading, through the MCID 7.0 system of densitometric digital analysis (Inter Focus Imaging LTDA, Linton, England). Subjective and objective classifications were compared under statistical analysis (Kolmogorov-Smirnov and Spearman Correlation Test, p<0.05). We found a positive correlation between the subjective findings of observers and digital analysis in all the categories of beta receptor. For the alpha receptor, there was a correlation only in extreme categories. The subjective evaluations by observers and digital method by measuring the relative optical density show statistically significant correlations in quantifying the estrogen receptors by immunohistochemistry staining. This indicates that both methods show accuracy for the proposed study.

RESUMEN

La inmunohistoquímica es un método de tinción específico para la detección de varias proteínas. Este método es importante en el diagnóstico de la presencia de receptores específicos, tales como los receptores de estrógeno. El objetivo de este estudio fue comparar dos métodos diferentes para evaluar la intensidad de la tinción inmunohistoquímica para detectar la presencia de RE en el tejido de la mucosa nasal el primero utilizando un sistema digital y el segundo a través de la observación directa de microscopía convencional. Tres profesionales especializados observaron sesenta y dos muestras teñidas las que fueron analizadas con microscopio óptico con la siguiente intensidad de tinción ausente, leve, moderada e intensa. Posteriormente, se obtuvo una medición objetiva a través de lectura de densidad óptica relativa (DOR) del sistema MCID 7.0 de análisis de densitometría digital (Inter Enfoque de imágenes LTDA, Linton, Inglaterra). Clasificaciones subjetivas y objetivas fueron comparadas bajo análisis estadístico (Kolmogorov-Smirnov y prueba de correlación de Spearman, p<0,05). Encontramos una correlación positiva entre los resultados subjetivos de los observadores y el análisis digital en todas las categorías de los receptores beta. Para el receptor alfa, hubo una correlación solamente en categorías extremas. Las evaluaciones subjetivas de los observadores y método digital midiendo la densidad óptica relativa muestran correlaciones estadísticamente significativas en la cuantificación de los receptores de estrógeno por tinción inmunohistoquímica. Por tanto ambos métodos demostraron ser correctos para el estudio propuesto.