Detección de serinocarbapenemasas de clase A y otros mecanismos de resistencia enzimática a β-lactámicos en cepas de enterobacterias con susceptibilidad disminuida a carbapenémicos, aisladas de pacientes de un hospital universitario de Santiago, Chile / Detection of serinocarbapenemases Class A and other mechanisms of enzymatic resistance to β-lactams in enterobacteria strains with diminished susceptibility to carbapenems isolated of patients in a university hospital

ABSTRACT

Background: The emergence of carbapenemase mediated resistance in Enterobacteriaceae has a strong clinical impact. This study aimed to do a genotypic and phenotypic characterization of the enzymatic resistance to β-lactams in clinical Enterobacteriaceae isolates with decreased susceptibility to carbapenems in a university medical center in Santiago. Methods: During April-September 2010 at Hospital Clinico Universidad de Chile, 23 isolates of carbapenem non susceptible Enterobacteriaceae were collected. We used PCR for the detection of class A carbapenemases (SME, IMI, NMC, GES and KPC) and the modified Hodge with the boronic acid test to phenotypically assess the presence of serine-carbapenemases. To assess extended spectrum β-lactamases (ESBLs) the CLSI phenotypic tests were performed. Metallo-β-lactamases (MBL) and AmpC were assessed with commercial tablets. Results: 18/23 were Klebsiellapneumoniae and 5/23 strains were Enterobacter cloacae. All PCR to class A carbapenemases were negative. 3/23 strains (all E. cloacae), were positive to the Hodge modified test and 1/23, a K.pneumoniae, was positive to the boronic acid test. ESBLs were detected in 14/23 os the strains and AmpC in 5/23. No MBL was detected. Conclusion: No class A serine-carbapenemasa was detected. The decreased susceptibility to carbapenems is probably explained by the β-lactamase activity and due to porin loss.

RESUMEN

Introducción: La emergencia de resistencia a β-lactámicos por carbapenemasas en enterobacterias tiene gran importancia clínica. El objetivo de este estudio fue caracterizar genotípica y fenotípicamente la resistencia enzimática a β-lactámicos en enterobacterias con susceptibilidad disminuida a carbapenémicos, en cepas aisladas de pacientes de un hospital universitario de Santiago. Metodología: Durante abril-septiembre 2010, en el Hospital Clínico de la Universidad de Chile se recolectaron 23 aislados. Se detectaron serinocarbapenemasas clase A (SME, IMI, NMC, GES y KPC) mediante RPC. Se empleó el test de Hodge modificado y acido fenil-borónico (APB) para la detección fenotípica de serinocarbapenemasas. Se detectó la presencia de β-lactamasas de espectro extendido según CLSI y AmpC y MBL mediante tabletas comerciales. Resultados: 18 cepas (78,26%) correspondieron a Klebsiella pneumoniae y 5 cepas (21,74%) a Enterobacter cloacae. Todas las RPC para serinocarbapenemasas fueron negativas, en tanto, el test de Hodge fue positivo para 3/23 cepas, todas E. cloacae. Una cepa de K. pneumoniae fue positiva para APB. Se detectó BLEE en 14/23 cepas, AmpC en 5/23 cepas y no se detectó MBL. Conclusiones: En las cepas estudiadas no se detectaron serinocarbapenemasas clase A. Probablemente los mecanismos que explican la susceptibilidad disminuida a carbapenémicos, involucran resistencia enzimática, combinados con cambios en la permeabilidad de la membrana bacteriana.