MOLECULAR VARIABILITY OF THREE GENES OF POTATO VEIN YELLOW VIRUS INFECTING Solanum tuberosum, USING SINGLE STRAND CONFORMATIONAL POLYMORPHISM / Variabilidad molecular de tres genes del virus del amarillamiento de las venas de la hoja de la papa que infecta Solanum tuberosum, mediante la técnica de polimorfismo conformacional de cadena sencilla

ABSTRACT

Potato yellow vein virus (PYVV), a virus with tripartite RNA (ss+) genome is classified as member of the genus Crinivirus within the family Closteoviridae. PYVV is the causal agent of potato yellow vein disease (PYVD) with yield loss between 25 %-50 % in field. Single strand conformational polymorphism (SSCP) has been reported to estimate variability in different viruses' species. In this study, the molecular variability of PYVV analyzed by SSCP patterns of three genes major capsid protein (CP), minor capsid protein (CPm), and heat shock protein (Hsp70) obtained from 60 virus isolates from potato plants expressing PYVD. Leaves collected in Nariño, Colombia from 30 Solanum tuberosum Phureja Group (PhG) and 30 from the Andigena Group (AG). Genes amplified by RT-PCR and the purified PCR products used for SSCP. Three SSCP patterns detected for the CP gene, 12 for CPm and 12 for Hsp70. The pattern C was the most frequent for the Hsp70 gene and the pattern IV (33.3 %) for CPm gene in the Andigena Group. The pattern 1 for CP gene was present in 93.3 % of both host groups, indicating low number of variants compared to the CPm and Hsp70 genes. This is the first attempt to estimate intra e inter PYVV variability by the use of a simple molecular method considering three genes in a large group of potato samples affected by PYVD. SSCP technique was useful to evaluate the viral variability.

RESUMEN

Potato yellow vein virus o virus del amarillamiento de venas de la hoja de la papa (PYVV) es un virus RNA tripartito (ss+) de la familia Closteroviridae género Crinivirus que causa la enfermedad de amarillamiento de nervaduras de la hoja de papa (PYVD) reduciendo la productividad, entre el 25 % y 50 %. La técnica de polimorfismo conformacional de cadena sencilla (SSCP) ha sido usada para estimar la variabilidad en diferentes especies de virus. En el presente trabajo se analizó la variabilidad molecular de 60 aislados de PYVV a partir de la comparación de tres genes el gen de la proteína mayor de la cápside (CP), proteína menor de la cápside (CPm) y la proteína de choque térmico (Hsp70). Los aislados se obtuvieron de dos grupos de Solanum tuberosum 30 del Grupo Phureja (GPh) y 30 del Grupo Andígena (GA), provenientes del departamento de Nariño, Colombia. Los genes se amplificaron por RT-PCR y los productos purificados se emplearon para SSCP en geles de poliacrilamida. Se detectaron tres perfiles de SSCP para el gen CP, 12 para el CPm y 12 para el Hsp70. Para el GA el perfil más frecuente del gen Hsp70 fue el perfil C (66,6 %) y para el gen CPm fue el IV (33,3 %). Para el gen CP, el patrón uno se encontró en el 93,3 % de los aislados, indicando menor variabilidad. Esta es la primera estimación de variabilidad de PYVV en diferentes genes y a través de una técnica molecular simple.