Avaliação da segurança e imunogenicidade da vacina candidata ao controle da tuberculose pVAXhsp65 administrada por eletroporação em macacos cynomolgus (Macaca fascicularis) / Evaluation of safety and immunogenicity of the vaccine candidate for tuberculosis control pVAX-hsp65 administered by electroporation in cynomolgus monkeys (macaca fascicularis)

RESUMO

A tuberculose é uma doença infecciosa crônica causada pelo Mycobacterium tuberculosis e foi declarada emergência em saúde pública mundial pela Organização Mundial de Saúde. A tuberculose persiste como um problema de saúde mundial, em parte, porque os indivíduos infectados, muitas vezes, não aderem ao longo tratamento de forma devida. A ampla vacinação com a BCG reduziu a ocorrência das formas mais graves de tuberculose em crianças, porém, a forma adulta pulmonar é responsável pela principal causa de morte no mundo. A validação de novas vacinas para utilização na clínica humana, passa pela necessidade de se testá-las, ainda em fase pré-clínica, em modelo animal que desenvolva e reproduza de forma semelhante a doença humana. Avaliamos, neste estudo, os aspectos referentes à segurança do método de eletroporação e a imunogenicidade da vacina pVAX-hsp65, administrada em 3 doses com intervalo de 1 mês cada, em macacos cynomolgusForam realizadas análises clínicas, hemograma, teste de função renal, hepática, além da avaliação das subpopulações celulares (TCD4, TCD8, NK, linfócitos B, células dendríticas mielóide e plasmacitóide), marcador de ativação celular (HLA-DR e CD69), grânulos citotóxicos (granzima B/perforina), citocinas (IFN-gama, TNF-alpha, IL-12, IL-10, IL-2, IL-4, IL-5 e IL-6), marcadores de proliferação (Ki-67) e ligados a apoptose (BcL-2). A vacina se mostrou segura, sem causar efeitos adversos relacionados ao local da inoculação, não induziu disfunção hepática ou renal nem alterações hematológicas. A vacinação não induziu conversão ao teste tuberculínico. Observamos um aumento de células T CD4+ de memória central, o que caracteriza ativação celular...

ABSTRACT

Tuberculosis is a chronic infectious disease caused by Mycobacteriumtuberculosis and was declared a public health emergency by World HealthOrganization. Tuberculosis remains a worldwide health problem, partly becauseinfected individuals often refuse the long- treatment. Widespread vaccinationwith BCG reduced the occurrence of severe forms of tuberculosis in children;however, pulmonary tuberculosis in adult is the main cause of deathworldwide. To validate new vaccines for clinical use in human, preclinical testsin animal model to reproduce human disease is necessary. Our mean goal wasto evaluated, the safety and immunogenicity of a new vaccine pVAX-hsp65,administrated by electroporation in cynomolgus monkeys in three doses withone month apart. Clinical analyzes were performed: Red and white blood cellscount, renal and liver functional test, evaluation of lymphocyte subsets (CD4,CD8, NK, B lymphocytes, and myeloid and plasmacytoide dendritic cells),markers for cell activation (HLA-DR and CD69), activation of cytotoxic granules(granzyme B / perforin), cytokines (IFN-gamma, TNF-alpha, IL-12, IL-10, IL-2, Il-4, IL-5and IL-6), proliferation (Ki-67) and anti-apoptosis (BCL-2) markers. The vaccineproved to be safe, with no adverse effects related to the inoculation site and didnot induce liver or kidney dysfunction or hematological changes. Thevaccination did not convert the tuberculin skin test. We observed anenhancement of central memory TCD4 lymphocytes which indicates cellactivation...