Evaluación de dos métodos de conservación para Kluyveromyces marxianus CCEBI 2011 en la Colección de Cultivos del CEBI / Evaluation of two conservation methods for Kluyveromyces marxianus CCEBI 2011 at the CEBI Culture Collection

RESUMEN

La elección de un método de conservación debe permitir mantener, entre otros parámetros, la viabilidad, pureza y estabilidad de las propiedades de una cepa. Kluyveromyces marxianus CCEBI 2011 es una levadura con atractivas potencialidades biotecnológicas, conservada en la Colección de Cultivos del CEBI mediante dos métodos: transferencia periódica y agua destilada estéril (método de Castellani). En este trabajo, para determinar la eficacia y calidad de los dos métodos utilizados para la conservación de K. marxianus CCEBI 2011, se evaluaron parámetros como viabilidad, pureza e identidad y propiedades biotecnológicas. Por ambos métodos se obtuvo una elevada pureza y una viabilidad de 5,31x1010 células/mL y 6,8x1010 células/mL por el método de Castellani y transferencia periódica, respectivamente. En este último se alcanzaron los mayores valores de tolerancia a etanol (11%), producción de etanol (6,08 ± 0,11 g/L) y actividad pectinolítica (15,29 ± 1,71 U/mL). En los dos métodos se corroboró la clasificación taxonómica de esta cepa como K. marxianus, según el análisis de las regiones ITS1-gen 5,8S ARNr-ITS2. Se demostró que los métodos de conservación empleados son efectivos, y que han mantenido con calidad las potencialidades biotecnológicas de este microorganismo por más de 10 años.

ABSTRACT

The election of a conservation method should allow maintaining, among other parameters, the viability, purity and stability of the properties of a strain. Kluyveromyces marxianus CCEBI 2011 is a yeast with attractive biotechnological potentialities, conserved at the CEBI Culture Collection by two methods: periodic transfer and sterile distilled water (Castellani method). In this study for determining the efficacy and quality of the two methods being used for the conservation of K. marxianus, we evaluated parameters such as viability, purity, identity and biotechnological properties. For both methods we obtained a high purity and a viability of 5.31x1010 cells/mL and 6.8x1010 cells/ mL, for the Castellani method and the periodic transfer method respectively. In this last method we obtained the highest values for ethanol tolerance (11%), ethanol production (6.08 ± 0.11 g/L) and pectonolitic activity (15.29 ± 1.71 U/mL). For the two methods the taxonomic classification of this strain as K. marxianus was corroborated according to the analysis of the ITSI-gen 5.8S ARNr-ITS2 regions. It was shown that the conservation methods being used are effective and that they have maintained the quality of the biotechnological potentialities of this microorganism during more than 10 years.