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Use of ELISA based on NcSRS2 of Neospora caninum expressed in Pichia pastoris for diagnosing neosporosis in sheep and dogs / Utilização de um ELISA baseado em NcSRS2 de Neospora caninum expressa em Pichia pastoris para diagnóstico de neosporose em ovinos e cães
Pinheiro, Amanda Fernandes; Borsuk, Sibele; Berne, Maria Elisabeth Aires; Pinto, Luciano da Silva; Andreotti, Renato; Roos, Talita; Roloff, Barbara Couto; Leite, Fábio Pereira Leivas.
  • Pinheiro, Amanda Fernandes; Universidade Federal de Pelotas. Instituto de Biologia. Departamento de Microbiologia e Parasitologia. Pelotas. BR
  • Borsuk, Sibele; Universidade Federal de Pelotas. Instituto de Biologia. Departamento de Microbiologia e Parasitologia. Pelotas. BR
  • Berne, Maria Elisabeth Aires; Universidade Federal de Pelotas. Instituto de Biologia. Departamento de Microbiologia e Parasitologia. Pelotas. BR
  • Pinto, Luciano da Silva; Universidade Federal de Pelotas. Instituto de Biologia. Departamento de Microbiologia e Parasitologia. Pelotas. BR
  • Andreotti, Renato; Universidade Federal de Pelotas. Instituto de Biologia. Departamento de Microbiologia e Parasitologia. Pelotas. BR
  • Roos, Talita; Universidade Federal de Pelotas. Instituto de Biologia. Departamento de Microbiologia e Parasitologia. Pelotas. BR
  • Roloff, Barbara Couto; Universidade Federal de Pelotas. Instituto de Biologia. Departamento de Microbiologia e Parasitologia. Pelotas. BR
  • Leite, Fábio Pereira Leivas; Universidade Federal de Pelotas. Instituto de Biologia. Departamento de Microbiologia e Parasitologia. Pelotas. BR
Rev. bras. parasitol. vet ; 24(2): 148-154, Apr-Jun/2015. graf
Article in English | LILACS | ID: lil-750757
ABSTRACT
Neosporosis is a disease caused by the protozoon Neospora caninum that leads to significant economic losses in many countries. In the present study, we report on use of the recombinant protein NcSRS2 of N. caninum expressed in Pichia pastoris in an indirect immunoenzymatic assay (ELISA) for diagnosing neosporosis infection in sheep and dogs. We observed that the ELISA test yielded specificity of 94.5% and sensitivity of 100% for sheep and specificity of 93.3% and sensitivity of 100% for dogs. We observed that the sensitivity was higher than shown by the indirect fluorescent antibody test, and this was confirmed by means of Western blot. The results from this study suggest that the recombinant protein expressed in P. pastoris is a suitable antigen for use in immunodiagnosis to detect N. caninum in two important species exposed to this parasitosis.
RESUMO
A neosporose é uma doença causada pelo protozoário Neospora caninum que leva a perdas econômicas importantes em muitos países. No presente estudo, é descrita a utilização da proteína recombinante NcSRS2 de N. caninum expressa em Pichia pastoris em um ensaio imunoenzimático indireto (ELISA) para o diagnóstico de infecção por Neospora em ovelhas e cães. Observou-se, que utilizando-se um ELISA, o teste produziu uma especificidade de 94,5% e uma sensibilidade de 100% para ovinos; e uma especificidade de 93,3% e sensibilidade de 100% para cães. Uma maior sensibilidade foi observada em relação à IFI que foi confirmada por Western blot. Os resultados deste estudo sugerem que a proteína recombinante expressa em P. pastoris é bom antígeno para ser utilizado no diagnóstico imunológico para detectar N. caninum em duas espécies importantes expostas a esta parasitose.
Subject(s)


Full text: Available Index: LILACS (Americas) Main subject: Protozoan Infections, Animal / Sheep Diseases / Enzyme-Linked Immunosorbent Assay / Protozoan Proteins / Neospora / Dog Diseases / Antigens, Protozoan / Antigens, Surface Type of study: Diagnostic study Limits: Animals Language: English Journal: Rev. bras. parasitol. vet Journal subject: Veterinary Medicine / Parasitology Year: 2015 Type: Article Affiliation country: Brazil Institution/Affiliation country: Universidade Federal de Pelotas/BR

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