Resveratrol como meio de estocagem para dentes avulsionados: estudo in vitro da viabilidade celular / Resveratrol as storage media for avulsed teeth: an in vitro study of cell viability

RESUMO

A manutenção dos dentes avulsionados em meios de estocagem adequados para a preservação da viabilidade celular é de extrema importância para o reparo do ligamento periodontal e prevenção do aparecimento das reabsorções radiculares, maior causa de perda dos dentes reimplantados. Recentemente, o resveratrol tem sido bastante estudado, em razão das suas propriedades antioxidante, anti-inflamatória, antimicrobiana e da sua capacidade de prolongar a vida de diversos organismos desde as leveduras até os mamíferos. Nesse contexto, o objetivo deste trabalho é analisar a eficácia do resveratrol como meio de estocagem para dentes avulsionados por meio da aferição da viabilidade estrutural e funcional celular, pelo método de exclusão pelo corante Azul de Tripan e metodologia colorimétrica a base de tetrazolato. Foi testado o resveratrol dissolvido em propilenoglicol + solução tampão salina-fosfato (PBS), o qual serviu de controle da solução. O leite ultrapasteurizado integral foi utilizado como meio comparativo por ser tradicionalmente utilizado e indicado para esse fim. Os controles positivos utilizados foram Meio Modificado Dulbecco Eagle (DMEM) e PBS, e o controle negativo, a água destilada. Foram utilizados dois tipos celulares mononucleares de sangue periférico humano e fibroblastos do ligamento periodontal humano mantidos em cultura e a avaliação da viabilidade celular in vitro foi feita por meio dos testes de exclusão pelo corante Azul de Tripan e colorimétrica a base de tetrazolato (MTT), sendo determinada nos tempos 1, 3, 6, 10 e 24 horas de incubação. Os ensaios foram realizados em triplicata e com 4 repetições. O resveratrol apresentou bons resultados com ambos os tipos celulares quando analisado pelo teste de exclusão por Azul de Tripan. Não houve diferenças entre o resveratrol e o leite ao longo do tempo. Quando analisado pela metodologia MTT, o resveratrol apresentou resultados inferiores ao leite e ao controle positivo DMEM (p<0,05). Baseado nesses...

ABSTRACT

The maintenance of avulsed teeth in appropriate storage media for the preservation of cell viability is very important for the repair of the periodontal ligament and to prevent the development of root resorption, which is the main cause of loss of replanted teeth. Recently, resveratrol has been extensively studied due to its antioxidant, anti-inflammatory and antimicrobial properties and ability to prolong the lives of several organisms since yeast to mammals. Thus, the aim of this study is to evaluate the effectiveness of resveratrol as storage media for avulsed teeth by measuring the structural and functional cell viability. The resveratrol dissolved in propylene glycol + phosphate-buffered saline (PBS), which was control of the solution, was tested. UHT milk was used as a comparative storage medium because it is traditionally used and indicated to this purpose. The positive controls used were Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM) and PBS, and the water as negative control. Two cell types were used human peripheral blood mononuclear cells and human periodontal ligament fibroblasts maintained in culture and the cell viability was analyzed by Trypan Blue exclusion test and the tetrazolium salt-based colorimetric assay (MTT) and determined at 1, 3, 6, 10 and 24 h of incubation. The tests were performed in triplicate and with 4 replications. The resveratrol presented good results with both cell types when analysed by Trypan Blue exclusion test. There were no differences between milk and resveratrol over time. When analysed by MTT assay, resveratrol presented inferior results than milk and positive control DMEM (p<0,05). Based on these results, it may be concluded that resveratrol was able to maintain the structural cell viability of the human peripheral blood mononuclear cells and periodontal ligament fibroblasts by Trypan Blue exclusion test. However, resveratrol not showed good performance while maintaining the functional viability of periodontal...