Identificación del polimorfismo c.2448-25G>A en pacientes con diagnóstico clínico de la enfermedad de Wilson / Identification of the c.2448-25G>A Polymorphism in Patients Clinically Diagnosed with Wilson’s Disease

RESUMEN

Fundamento La enfermedad de Wilson se caracteriza por la acumulación de cobre en hígado, cerebro y córnea. La causa molecular que la provoca son las mutaciones en el gen atp7b. Se han informado en la literatura varios polimorfismos en el gen atp7b.Objetivo: identificar los cambios conformacionales en el fragmento intrón 9-exón 10 para la detección del polimorfismo c.2448-25G>A en el gen atp7b de pacientes cubanos con diagnóstico clínico de enfermedad de Wilson.Métodos: se realizó un estudio descriptivo, en el Centro Nacional de Genética Médica, durante el período 2008-2012, que incluyó 100 pacientes con diagnóstico clínico de enfermedad de Wilson. Para la amplificación del fragmento de interés, se utilizó la técnica de Reacción en Cadena de la Polimerasa y para identificar los cambios conformacionales se aplicó la técnica de Polimorfismo Conformacional de Simple Cadena, en la región intrón 9-exón 10 del gen atp7b. La presencia del polimorfismo c.2448-25G>A fue identificada por secuenciación del fragmento analizado.Resultados: el cambio conformacional denominado b, correspondió al polimorfismo c.2448-25G>A en estado heterocigótico. La frecuencia alélica del polimorfismo c.2448-25G>A en 100 pacientes cubanos diagnosticados clínicamente con la enfermedad de Wilson, fue de 8,5 %. Las manifestaciones más frecuentes en los pacientes que presentaron este polimorfismo, fueron las hepáticas.Conclusión: se identificó por primera vez en Cuba el polimorfismo c.2448-25G>A, lo cual posibilitará hacer estudios moleculares por métodos indirectos.

ABSTRACT

Background: Wilson’s disease is characterized by copper accumulation in the liver, brain and cornea. It is caused by mutations in the ATP7B gene. Several polymorphisms in the ATP7B gene have been reported in the literature.Objective: to identify conformational changes in the fragment comprising intron 9-exon 10 for detecting the c.2448-25G> A polymorphism in the ATP7B gene of Cuban patients clinically diagnosed with Wilson’s disease.Methods: a descriptive study including 100 patients with clinical diagnosis of Wilson’s disease was conducted at the National Medical Genetics Center from 2008 to 2012. The polymerase chain reaction was used to amplify the fragment of interest and the single-strand conformation polymorphism was applied in the intron 9-exon 10 region of the ATP7B gene to identify conformational changes. Presence of the c.2448-25G> A polymorphism was detected by sequencing this fragment.Results: the conformational change called b corresponded to the c.2448-25G> A polymorphism in heterozygous state. The allele frequency of the c.2448-25G> A polymorphism in 100 Cuban patients clinically diagnosed with Wilson’s disease was 8.5%. The most common manifestations in patients with this polymorphism were related to the liver.Conclusion: the c.2448-25G> A polymorphism was identified in Cuba for the first time, which will enable molecular studies by indirect methods.