Real-time PCR for detection of Brucella ovis and Histophilus somni in ovine urine and semen / PCR em tempo real para detecção de Brucella ovis e Histophilus somni em urina e sêmen ovino
Arq. bras. med. vet. zootec
; 67(6): 1751-1755, nov.-dez. 2015. tab, graf
Article
in En
| LILACS
| ID: lil-768141
Responsible library:
BR68.1
RESUMO
A epididimite infecciosa ovina é uma das principais enfermidades reprodutivas de carneiros. O presente estudo teve por objetivo desenvolver protocolos de PCR em tempo real para B. ovis e H. somni e avaliar sua aplicabilidade em amostras de sêmen e urina de carneiros. Delinearam-se primers e sondas espécie-específicos para cada agente. As sondas foram delineadas com o sistema TaqMan incorporando um marcador FAM para B. ovis e Cy5 para H. somni na extremidade 5' e um quencher na extremidade 3'. A PCR em tempo real para B. ovis e H. somni foi altamente sensível, uma vez que a amplificação de DNA ocorreu com até 0,2ng de DNA/reação. A especificidade dos iniciadores e sondas foi avaliada com amostras de DNA de outros agentes causadores de epididimite ovina e nenhuma amplificação inespecífica foi observada. A aplicabilidade da técnica em amostras biológicas também foi confirmada, pois não houve perda de eficácia (P>0,05) quando comparada à PCR convencional com amostras de sêmen e urina de carneiros experimentalmente infectados.
Key words
Full text:
1
Index:
LILACS
Main subject:
Semen
/
Urine
/
Sheep
/
Pasteurellaceae
/
Brucella ovis
/
Epididymitis
Type of study:
Diagnostic_studies
Limits:
Animals
Language:
En
Journal:
Arq. bras. med. vet. zootec
Journal subject:
MEDICINA VETERINARIA
Year:
2015
Type:
Article