Identificação de antígenos imunodominantes em Leptospira spp. através de microarranjo de proteínas / Identification of immunodominant antigens in leptospira spp. using protein

RESUMO

A leptospirose é uma zoonose cosmopolita grave causada por bactérias patogênicas do gêneroLeptospira sp. Existem mais de 260 sorovares divididos em 13 espécies patogênicas cujaprevalência varia em diferentes regiões geográficas. O teste de aglutinação microscópica(MAT), considerado o padrão-ouro, é realizado apenas em poucos laboratórios de referência etem baixa sensibilidade no início da doença. Assim, o desenvolvimento de um teste dediagnóstico precoce sensível e universalmente eficaz permitirá o tratamento adequado erefletirá a verdadeira incidência da doença. Portanto, foi desenvolvido anteriormente ummicroarranjo de proteínas que compreendeu o genoma de L. interrogans Copenhageni cepaFiocruz L1-130. A resposta imune por IgG foi investigada utilizando soros de pacientes emfase aguda e convalescente da doença, infectados pela referida espécie, obtidos emSalvador/BA. O estudo permitiu a identificação de antígenos para os quais foram detectadosanticorpos nos pacientes estudados, mas não em indivíduos saudáveis. O objetivo do presentetrabalho foi identificar, dentro desse grupo de antígenos imunodominantes anteriormentedefinido, aqueles que podem ser utilizados em um ensaio para o diagnóstico de pacientesinfectados por diferentes espécies e sorovares de Leptospira. As respostas por anticorpos IgGde 308 indivíduos diagnosticados com leptospirose em áreas de transmissão endêmicas e nãoendêmicas de diferentes locais em todo o mundo e 32 indivíduos saudáveis de uma área nãoendêmica dos Estados Unidos foram analisadas. Nove antígenos foram identificados comosororeativos em até cinco das áreas avaliadas localizadas em diferentes continentes (África,Europa, Ásia, América do Norte, América do Sul e Oceania). Entre estes, os segmentos dasproteínas Ligs mostraram ser diferencialmente reativos em todos os locais...

ABSTRACT

Leptospirosis is a serious cosmopolitan zoonosis caused by pathogenic bacteria of thegenus Leptospira sp. There are over 260 serovars divided into 13 pathogenic species whoseprevalence varies in different geographical regions. The microscopic agglutination test(MAT), considered the gold standard, is performed only in a few reference laboratories andhas low sensitivity in the early course of the disease. Thus, the development of an earlydiagnostic test, sensitive and universally efficient allows the right treatment and reflects thetrue incidence of the disease. Therefore, a protein microarray comprising the genome of L.interrogans serovar Copenhageni Fiocruz L1-130 strain was previously developed. The IgGimmune response was investigated using sera from patients in acute and convalescent phaseof the disease, infected by that species, obtained in Salvador/BA. The study allowed theidentification of antigens to which antibodies were detected in the studied patients but not inhealthy individuals. The aim of this project was to identify within that immunodominantantigens group previously defined, those that can be used in a test for the diagnosis of patientsinfected with different species and serovars of Leptospira. We investigated the response byIgG antibodies of 308 individuals diagnosed with leptospirosis in endemic and non-endemictransmission areas of different locations worldwide and 32 healthy subjects from a nonendemicarea of the United States. Nine antigens were identified as seroreactive up to five ofthe evaluated areas located in different continents (Africa, Europe, Asia, North and SouthAmerica and Oceania). Among these, the segments of Lig proteins were shown to bedifferentially reactive in all locations...