Determinación del pH intracelular por distribución de ácido benzoico en S. cerevisiae, transporte de aminoácidos y gradiente de protones / Determination of internal pH of S. cerevisiae from the distribution of benzoic acid: amino acids transport and proton gradient

RESUMEN

El (pHi) de Saccjaromyces cerevisiae, cepa silvestre y su mutante rhose determinó por el método de distribución intra-extracelilar del ácido 14C-benzoico. Los valores de pHi obtenidos (con un pH externo de 4,5) variarón con la depa de levadura y dependieron de las condiciones metabólicas de las mismas. En células de la cepa silvestre, energizada por incubación previa con glucosa 5 mM, el pHi osció entre 6,15-6,40 y el gradiente de protones a través de la membrana deltapH entre 1,65-1,90 ó -97 a -112 mV. Esos valores fueron mayores que los de células ayunadas pHi 5,90, deltapH 1,40 ó -82 mV. En esas dos condiciones metabólicas, los valores en la mutante rho- fueron algo menores que en la cepa silvestre; levadura rho- energizada pHi 6,05, deltapH 1,55 ó -91 mV; levadura rho- ayunada pHi 5,70, deltapH 1,20 ó -71 mV. Los protonófros DNP y PCP produjeron una disminución del pHi del deltapH y una inhibición de la entrada de L-leucina por los sistemas S1, alta afinidad y baja velocidad y S2, baja afinidad y alta velocidad. Los valores de la disminución del deltapH y la inhibición del transporte de L-leucina obtenidos indican que no hay una relación estricta entre el deltapH y el proceso de transporte