Obtención de cultivos primarios de estroma prostático benigno y tumoral mediante explantes de tejido desde biopsias por punción / Obtaining primary cultures of bening and tumoral prostatic stromal tissue through explants from needle biopsias

RESUMEN

La progresión del cáncer de próstata (CaP) es regulada por el microentorno tumoral,el cual tiene como principal componente el estroma asociado al carcinoma (CAS). Sin embargo, los métodos experimentales usando cultivos primarios para modelar el comportamiento del estroma tumoral han sido insatisfactorios debido a la dificultad de obtener cultivos primarios de células estromales prostáticas humanas (Hpscs) con alta proporción de CAS. Así, el objetivo de este estudio consistió en estandarizar una metodología que permita ta obtención de cultivos primarios de HPSCs con alta proporción de CAS. Métodos: se recolectaron biopsias prostáticas de 10 pacientes,5 de ellos con CaP localmente avanzado y/o metastásico, y 5 sin evidencia de neoplasia. Se evaluó la proporción estromal por estudios histológicos y se estandarizó la obtención de cultivos primarios de HPScs mediante explantes de tejido. Los culilvos se caracterizaron por curvas de crecimiento y proliferación Resultados: El tejido obtenido desde biopsias prostáticas por punción de pacientes con CaP localmente avanzado y/o metastásico presentan alta proporción de CAS. La técnica explantes de tejido permite la obtención de cultivos primarios de HPSC desde biopsias, indicando además que cultivos primarios de CAS presentan un patrón de crecimiento y proliferación, superior a las células obtenidas de tejido benigno (BAS). Discusión: Nuestro estudio demuestra que a través de la técnica explantes de tejido es posible obtener cultivos primarios de HPSCs con CaP invasor, debido a que estos presentan zonas con alta proporción de CAS...

ABSTRACT

Tumor microenvironment plays a critical role in the progression of prostate cancer (CaP), which main component ¡s the ®carcinoma associated stroma¼ (CAS).However, the in vitro models utilizing human prostate stroma cells (HPSCs) as primary cultures have failed in recapitulate the human prostate microenvironment due to the unfeasibility to obtain primary cultures of HPSCs with a pure population of CAS. The aim of this study was to standardize a new methodology that allow to obtain primary cultures of HPSCs with high proportion of CAS. Methods: Primary cultures of HPSCs were obtained from explants of human needle biopsies from 5 benign and 5 locally advances and/or metastatic human prostate tissues. The primary cell cultures were characterized by proliferation rates and growth curves. Locally advanced and/or metastatic prostate needle biopsies exhibit a high presence of CAS. The analysis of human primary cultures isolated from benign and malignant prostate tissue explants revealed distinctive populations of HPSCs that can be distinguishable by proliferation rates and growth curves. Discussion: our studies demonstrated for the first time that prostate explants from needle biopsy, represents a feasible technique to obtain primary cultures of stromal cells from benign and malignant tissues, and represents in more accurate way the complexity of the tumor microenvironment...