Biochemistry of the evolution of Triatoma infestans: XI. Hemolymph lipophorin

RESUMEN

Se aisló y purificó la lipoforina del T.infestans a partir de hemolinfa de machos adultos por ultracentrifugación en gradiente de densidad en dos etapas. Esta lipoproteína tiene una densidad de 1.10 g/ml y está constituida por 53% de proteínas y 47% de lípidos. El radio de Stokes (Rs) de la molécula, determinado por cromatografía de filtración en gel, es aproximadamente de 73A y e;l peso molecular (Mr) calculado por el método de Margolis, es de 743 000 daltons. La lipoforina contiene dos apoproteínas: apolipoforina I (apoLp-I) con Mr = 255 000 y apolipoforina II (apoLp-II) con Mr = 78 000, siendo ambas glicosiladas. La composición de aminoácidos de la apoLp-I y de la apoLp-II presenta un elevado contenido de aspartato, glutamato y leucina y muy pequeña cantidad de metionina y cisteína. Los lípidos de la lipoforina comprenden: diacilgliceroles (41.4% de los lípidos totales), fosfolípidos (31.5%), hidrocarburos (12.2%), ácidos grasos libres (6.1%), colesterol (4.7%) y triacilgliceroles (4.1%). La fosfatidiletanolamina es el fosfolípido predominante con cantidades menores de fosfatidilcolina. Al tratar la lipoforina con tripsina, la apoLp-I sufre ruptura proteolítica, mientras que la apoLp-II es resistente. La anisotropía de fluorescencia del difenilhexatrieno (DPH) incluido en la lipoforina señala una fuerte interacción lípido-apoproteína, la cual no se modifica después de una extensa proteólisis de la apoLp-I con tripsina. Durante la tripsinización de la lipoproteína no se detectó...