Purificación del componente C4 del sistema complemento humano y obtención de un antisuero específico / Purification of C4 component of the human complementb system and attainment of a specific antiserum

RESUMEN

Se describe un método de purificación del componente C4 del sistema complemento a partir de suero humano, mediante una combinación de cromatografía de intercambio iónico y de afinidad y la preparación de un antisuero específico. El suero humano calentado a 56 C durante 30 minutos se fraccionó por medio de una columna de DEAE-52 con solución tampón fosfato 0,01 M, pH 7,0 + NaCl 0,075 M. Se aplicó un gradiente lineal de concentración mediante el empleo de solución amortiguadora de fosfato 0,01 M, pH 7,0 + NaCl 0,075 M-1,5 M. Se detectó la presencia de C4 en las fracciones eluidas y las seleccionadas se aplicaron a una colunma de Spharose 4 B a la cual se acopló la fracción IgG de un suero anti C4. Mediante electroforesis en gel de poliacrilamida e inmunoelectroforesis contra un suero antiproteinas séricas humanas y un antisuero específico, se determinó la pureza del C4 obtenido. A partir del C4 purificado se produjo un antisuero potente y de buena calidad, en conejos, útil para la cuantificación del C4 sérico