Ensayo diagnóstico para IgE humana por ultramicroELISA empleando anticuerpos monoclonales / Diagnostic assay for human IgE by ultramicroELISA using monoclonal antibodies

RESUMEN

La cuantificación de las concentraciones séricas de la inmunoglobulina E (IgE), tiene gran importancia diagnóstica en las enfermedades alérgicas. En Cuba existe, desde 1987, un programa nacional de diagnóstico de esta entidad, que emplea como elemento tecnológico fundamental un sistema ultramicroELISA (UME), tipo sandwich con anticuerpos policlonales, anti IgE. La introducción de anticuerpos monoclonales (AcM) en estos procedimientos puede proporcionar ventajas, especialmente lo que se refiere a especificidad, y producción de los reactivos. Nosotros hemos obtenido hibridomas secretores de AcM contra IgE, mediante la fusión del mieloma P3/x63.Ag8.653, con linfocitos esplénicos de ratones inmunizados con una preparación purificada de IgE humana monoclonal. Los 10 AcM obtenidos, parecen reconocer determinantes antigénicos alotípicos de la cadena * humana. El CP-IgE.1 (IgG2a) se estudió a mayor profundidad con anticuerpo de captura y revelado, en UME. Se demostró que este AcM puede sustituir efectivamente al anticuerpo policlonal de recubrimiento y puede ser empleado también como segundo anticuerpo en esta técnica. Se evaluó el funcionamiento de un UME con el CB-IgE. En la fase sólida y un anticuerpo policlonal de revelado en la cuantificación de IgE a partir de muestras de pacientes, obteniéndose 100 % de coincidencia diagnóstica con el UME policlonal, y repetibilidad y reproducibilidad adecuadas