Ginsenoside Rb1 promotes oxeiptosis in hepatocellular carcinoma HepG2 cells through KEAP1/PGAM5/AIFM1 pathway / 中国肿瘤生物治疗杂志

ABSTRACT

@#[摘 要] 目的：探讨人参皂苷Rb1（Gn-Rb1）对肝细胞癌（HCC）HepG2细胞氧死亡的影响及其可能的分子机制。方法：采用生物信息学方法分析氧死亡的关键基因PGAM5表达对HCC患者生存期的影响。选取辽宁省肿瘤医院收治的8例HCC患者的HCC组织与癌旁组织，通过WB法及qPCR检测氧死亡相关基因蛋白与mRNA的表达情况。将HepG2细胞随机分为对照组与Gn-Rb1组（予以200 μmol/L Gn-Rb1干预），采用细胞克隆形成实验、划痕愈合实验分别检测Gn-Rb1对HepG2细胞的集落形成能力、迁移能力的影响，ELISA检测对细胞ROS生成水平的影响，微板法检测对细胞LDH释放水平的影响；WB法、qPCR法检测Gn-Rb1对HepG2氧死亡关键基因蛋白质与mRNA水平表达的影响。结果：生物信息学分析发现，PGAM5高表达肝癌患者总生存时间较低表达患者更长（P<0.05）。在临床HCC组织与癌旁组织样本中发现，相较于癌旁组织，在蛋白质与mRNA水平上，肿瘤组织KEAP1与PGAM5表达显著降低，NRF2表达显著升高（均P<0.01），p-AIFM1蛋白水平显著升高（P<0.05）。对HepG2细胞予以200 μmol/L Gn-Rb1干预后，相较于对照组，Gn-Rb1组HepG2细胞的迁移能力与集落形成能力显著降低（均P<0.01），而LDH水平显著升高（P<0.05）；相比于对照组，在mRNA和蛋白质水平上，Gn-Rb1组细胞中KEAP1、PGAM5表达均显著升高而NRF2表达均显著降低（均P<0.05），p-AIFM1蛋白表达显著降低（P<0.01）。结论：HCC组织中氧死亡被抑制，而Gn-Rb1能够通过调控KEAP1/PGAM5/AIFM1通路促进HepG2细胞氧死亡的发生，抑制细胞增殖和迁移能力。