Lycorine hydrochloride regulates the malignant biological behaviors of liver cancer HCCLM3 cells through the circASH2L/miR-124-3p axis / 中国肿瘤生物治疗杂志

ABSTRACT

@#［摘要］ 目的：探讨盐酸石蒜碱（lycorine hydrochloride，LH）对肝癌HCCLM3 细胞恶性生物学行为的影响及其对circASH2L/ miR-124-3p轴的调控作用。方法：将HCCLM3细胞分为不同浓度LH处理组（LH-L、LH-M、LH-H组）和Con、si-NC、si-circASH2L、 LH+pcDNA、LH+pcDNA-circASH2L 组；以CCK-8 法、平板克隆形成实验、流式细胞术、细胞划痕实验和Transwell 小室实验分别 检测HCCLM3 细胞的增殖、克隆形成、凋亡、迁移和侵袭；qPCR法检测HCCLM3 细胞中circASH2L和miR-124-3p 的表达量；双荧 光素酶报告基因实验检测circASH2L 和miR-124-3p 的靶向关系；WB 法检测cleaved-caspase3、cleaved-caspase9、E-cadherin、 N-cadherin 蛋白表达量。结果：与Con 组比较，LH不同浓度组细胞增殖抑制率升高（P<0.05），凋亡率与cleaved-caspase3、cleavedcaspase9 、E-cadherin 蛋白水平升高（均P<0.05），miR-124-3p 的表达水平升高（P<0.05），克隆形成数与侵袭细胞数减少（均 P<0.05），划痕愈合率与N-cadherin 蛋白水平降低（P<0.05），circASH2L 的表达水平降低（P<0.05），且不同浓度组间比较差异有统 计学意义（P<0.05）。circASH2L 可负向调控miR-124-3p。与si-NC 组比较，si-circASH2L 组细胞增殖抑制率升高（P<0.05），凋亡 率与cleaved-caspase3、cleaved-caspase9、E-cadherin 蛋白水平升高（均P<0.05），划痕愈合率与N-cadherin 蛋白水平降低（均 P<0.05），克隆形成数与侵袭细胞数减少（均P<0.05）。与LH+pcDNA组比较，LH+pcDNA-circASH2L 组miR-124-3p 的表达水平 降低（P<0.05），细胞增殖抑制率降低（P<0.05），凋亡率与cleaved-caspase3、cleaved-caspase9、E-cadherin 蛋白水平降低（均 P<0.05），克隆形成数与侵袭细胞数增多（均P<0.05），划痕愈合率与N-cadherin 蛋白水平升高（均P<0.05）。结论：LH可通过调控 circASH2L/miR-124-3p 轴来抑制肝癌细胞HCCLM3 的增殖、迁移、侵袭并诱导其凋亡。