Anti-HSP90 antibody promotes the anticancer effect of cisplatin by inhibiting human gastric cancer stem cells through internalizing eHSP90 / 中国肿瘤生物治疗杂志

ABSTRACT

@#[摘 要] 目的：探索抗HSP90单克隆抗体28C10通过靶向肿瘤干细胞促进顺铂（cisplatin，DDP）对人胃癌细胞PAMC82恶性生物学行为的抑制效果及其可能的作用机制。方法 28C10单独或与DDP联合处理人胃癌细胞PAMC82，采用不同实验方法检测该细胞的无血清成球能力、迁移和侵袭能力与克隆形成能力，CCK-8法检测28C10对PAMC82细胞恶性生物学行为和协同DDP抗癌能力的影响。采用细胞免疫荧光及流式细胞术检测PAMC82细胞中HSP90及eHSP90（extracellular HSP90）的表达、定位、eHSP90+亚群比例，以及28C10处理后对ALDH+、CD44+、eHSP90+细胞亚群的影响。采用WB实验检测28C10作用后PAMC82细胞中HSP90、干性相关蛋白以及PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白表达的变化。结果：胃癌细胞PAMC82膜表面表达eHSP90，具有2%~3%的eHSP90+细胞亚群，且eHSP90+细胞多为与ALDH+或CD44+共阳性细胞。28C10处理能显著抑制PAMC82细胞的成球、克隆形成、增殖、耐药、迁移及侵袭能力，而且和DDP联用的效果更明显（P<0.05或P<0.01）。流式细胞术分析发现28C10处理显著抑制PAMC82细胞的eHSP90+、ALDH+和CD44+亚群数量（均P<0.01）。免疫荧光实验发现28C10作用后eHSP90发生内吞，WB实验结果显示eHSP90、CD44、ALDH和干性相关蛋白OCT4、SOX2表达量均降低（P<0.05或P<0.01）。结论：抗HSP90单克隆抗体28C10可靶向胃癌PAMC82细胞的ALDH+、CD44+肿瘤干细胞相关亚群、内化eHSP90且降低细胞总HSP90的水平、抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路，从而有效地抑制PAMC82细胞的干性、耐药和其他恶性生物学行为，协同DDP显著提高抗癌效果。