Characteristics and functions of long-term passaged human umbilical cord mesenchymal stem cells / 中国肿瘤生物治疗杂志

ABSTRACT

@#[摘 要] 目的：探讨传至10代（P10）的人脐带来源间充质干细胞（P10-hUC-MSC）的生物学特性及功能。方法：人脐带来源于厦门弘爱医院（伦理批号：HAXM-MEC-20201012-037-01），分离、收集、培养hUC-MSC并传代培养，收集P1-、P10-hUC-MSC，FCM检测hUC-MSC表型，细胞衰老β-半乳糖苷酶染色法及FCM法检测终末期细胞衰老与凋亡情况，秋水仙碱处理检测细胞染色体稳定性，体外成脂、成骨诱导实验检测其多向分化能力，以不同比例与外周血单个核细胞（PBMC）混合培养后FCM检测T细胞亚群及表型变化。结果：成功分离和培养的P10-hUC-MSC与P1-hUC-MSC的表型相似，表现为CD45、CD34、HLA-DR表达阴性而CD105、CD90阳性率≥95%。终末期的P1-hUC-MSC和P10-hUC-MSC均表现出β-半乳糖苷酶表达阳性和早期凋亡特征，细胞染色体核型一致且保持稳定，未发生转化现象。P1-、P10-hUC-MSC在体外都可被诱导分化成脂肪、成骨细胞。P10-hUC-MSC与PBMC以1∶1混合培养7 d后，可显著上调CD4+/CD8+ T细胞比值、CD4+ Treg细胞比例和PD-1表达（均P<0.01）。结论：长期传代的P10-hUC-MSC仍然保持其生物学特性和安全性，并具备多向分化能力及免疫调节能力，这为最大限度发挥hUC-MSC的临床放疗损伤修复与预防作用提供了前期实验依据和指导。