Cultura de fibroblastos dérmicos humanos na presença de ácido hialurônico e polietilenoglicol: efeitos na proliferação celular, produção de colágeno e enzimas relacionadas à remodelação da matriz extracelular / Culture of human dermal fibroblasts in the presence of hyaluronic acid and polyethylene glycol: effects on cell proliferation, collagen production, and related enzymes linked to the remodeling of the extracellular matrix

RESUMO

Introdução: Os preenchimentos cutâneos representam procedimentos comuns na dermatologia atual, sendo a maioria realizada com ácido hialurônico isolado ou associado a outras substâncias. Objetivo: Estudar os efeitos da adição de ácido hialurônico e polietilenoglicol a culturas de fibroblastos dérmicos humanos. Métodos: Foram avaliados: proliferação celular e produção de colágeno tipo 1 (COL1A1), na presença ou não de anticorpos antiCD44 (receptor de membrana de ácido hialurônico); síntese de metaloproteinase1 (MMP-1), fator tecidual inibidor de metaloproteinase1 (TIMP-1) e fator transformador de crescimento ß (TGF-ß), pela análise da expressão gênica via PCR (polymerase chain reaction); proliferação celular através da detecção da incorporação de um análogo da timidina no DNA celular. Resultados: Observou-se aumento na proliferação dos fibroblastos, bem como da síntese de colágeno nas culturas expostas ao ácido hialurônico, inibido parcialmente pela presença dos anticorpos antiCD44 nas culturas. A exposição das culturas ao ácido hialurônico aumenta a produção de TIMP-1 e TGF-ß e reduz a expressão de MMP-1. Esses efeitos não foram notados nas culturas expostas ao polietilenoglicol. Conclusão: In vitro, a adição de ácido hialurônico a culturas de fibroblastos dérmicos humanos aumenta a proliferação e síntese de COL1A1,TIMP-1 e TGF-ß, diminuindo a de MMP-1.A adição de antiCD44 às culturas reduz a proliferação celular e síntese de colágeno, podendo indicar o papel desse receptor na mediação desses eventos.

ABSTRACT

Introduction: Cutaneous fillings are a common procedure in today's dermatology, with the majority being carried out with hyaluronic acid isolated or combined with other substances. Objective: To study the effects of adding hyaluronic acid and polyethylene glycol to cultures of human dermal fibroblasts. Methods: The study evaluated: cell proliferation and production of type 1 collagen (COL1A1) in the presence or absence of anti-CD44 antibodies (membrane receptor for hyaluronic acid); the synthesis of metalloproteinase-1 (mmp-1), of tissue factor inhibitor of metalloproteinase-1 (TIMP - 1) and of transforming growth factor-α (TGF-α) through the analysis of gene expression via PCR (polymerase chain reaction); cell proliferation through the detection of the incorporation of a thymidine analogue in the cellular DNA. Results: Increased proliferation of fibroblasts and collagen synthesis were observed in the cultures exposed to hyaluronic acid, partially inhibited by the presence of anti-CD44 antibodies in the cultures. The exposure of cultures to hyaluronic acid enhances the production of TIMP-1 and TGF - α, and reduces the expression of MMP-1. These effects were not noticed in the cultures exposed to polyethyene glycol. Conclusion: In an in vitro setting, the addition of hyaluronic acid to cultures of human dermal fibroblasts increases proliferation and synthesis of COL1A1, TIMP-1 and TGF-α, decreasing that of MMP-1. The addition of anti-CD44 to the cultures reduces cell proliferation and collagen synthesis, which may indicate the role of that receptor in mediating those events.