Validación del agar Mueller Hinton modificado para la determinación de las concentraciones mínimas inhibitorias a los antifúngicos por etest en candida spp / Validation of the modified Mueller Hinton agar for the determination of the minimum inhibitory concentrations to antifungals by E-test in Candida spp

RESUMEN

En este trabajo de investigación se determinaron las Concentraciones Mínimas Inhibitorias (CMI) de los antifúngicos fluconazol, voriconazol, posaconazol, caspofungina, anidulafungina y anfotericina B, por los métodos de microdilución en caldo y difusión en agar con Etest, empleando RPMI 1640 agar y Mueller Hinton modificado (MHm), en 102 cepas de Candida spp., aisladas de sangre, provenientes de la Red de Candidemia del INHRR. El objetivo fue validar el empleo del MHm como medio de cultivo confiable en el método de Etest para la obtención de las CMI. Se utilizaron las cepas C. parapsilosis ATCC 22019 y C. krusei ATCC 6258 como control de calidad. Los resultados demostraron un 94% de frecuencia para C. no albicans y un 6% para C. albicans. Se obtuvo un 100% de sensibilidad para las equinocandinas y anfotericina B, en todas las especies. El MHm demostró una elevada reproducibilidad con respecto al RPMI agar y el método de referencia microdilución en caldo. En base a los resultados obtenidos en esta investigación, se logró la validación del medio MHm para la determinación de las CMI por Etest, así como la detección de resistencia, recomendándolo como metodología confiable, accesible y de fácil ejecución para uso rutinario en el laboratorio de microbiología.

ABSTRACT

In this research, the Minimum Inhibitory Concentrations (MICs) of the antifungal agent's fluconazole, voriconazole, posaconazole, caspofungin, anidulafungin and amphotericin B were determined by broth microdilution and agar diffusion Etest methods, using RPMI 1640 agar and modified Mueller Hinton (mHM), in 102 strains of Candida spp., isolated from blood, from the Candidemia Network of the INHRR. The objective was to validate the use of mHM as a reliable culture medium for the Etest method to obtain MICs. As a quality control, the strains C. parapsilosis ATCC 22019 and C. krusei ATCC 6258 were used. The results demonstrated a 94% of frequency for non C. albicans and 6% for C. albicans. A 100% of sensitivity was obtained for echinocandins and amphotericin B in all species. The mHM showed high reproducibility with respect to RPMI agar and the reference method of microdilution broth. Based on the results obtained in this investigation, the validation of mHM medium, for the determination of MICs by Etest, as well as the resistance detection was achieved, recommending it as a reliable, affordable and easy to implement method for the routine use in the microbiology laboratory.