Avaliação morfométrica e estereométrica dos tecidos periodontais de ratos imunossuprimidos por Tacrolimus (FK506) / Evaluation of morphometric and stereometric of periodontal tissues at immunosuppressed of Tacrolimus (FK506)

RESUMO

Tacrolimus (FK506) é uma droga imunossupressora usada em transplantes de órgãos e também como terapia alternativa em pacientes com rejeição refratária de enxertos ou intolerância à ciclosporina A (CsA), sem os efeitos adversos atribuídos frequentemente à CsA. Atualmente não há estudos que explorem os efeitos da administração de FK506 por longos períodos sobre o periodonto. Ë sugerido também que terapias imunossupressivas, principalmente com FK506, possam ser um importante fator no desenvolvimento de diabetes mellitus póstransplantes (PTDM). Existem alguns estudos explorando os efeitos do FK506 por longos períodos no desenvolvimento da PTDM em protocolos animais. Assim os objetivos do estudo foram avaliar os efeitos da terapia com FK506 por longos períodos sobre os tecidos gengivais, metabolismo do osso alveolar e do cemento de ratos, bem como os efeitos sobre os níveis glicêmicos. Quatro grupos, com 10 ratos cada, foram tratados com FK506 injetados subcutaneamente em doses diária de 1mg/Kg por peso corporal. A escolha dessa dosagem foi suficiente para que o FK506 atingisse os níveis séricos terapêuticos. Os períodos experimentais foram de 60, 120, 180 e 240 dias. Quatro grupos, com 10 ratos cada, foram usados como controles nos mesmos períodos experimentais e recebeu subcutaneamente, injeção de solução salina durante todos os períodos. Ao final de cada período experimental, coletas de sangue foram realizadas para medir os níveis séricos de glicemia, cálcio e fosfatase alcalina (ALP). Após o processamento histológico, o tecido conjuntivo e epitélio oral, bem como a densidade volumétrica de fibroblastos (Vf), fibras colágenas (Vcf) e outras estruturas (Vo) e ainda osso alveolar e cemento, bem como densidade volumétrica de osso (Vb) e osteoclastos (Vo) foram medidas na região primeiro molar inferior. Após 180 e 240 dias de tratamento com FK506, houve evidente crescimento gengival associado com um significante aumento de tecido epitelial e conjuntivo. Houve ainda um aumento de Vf, Vcf e Vo. Com relação ao metabolismo ósseo, houve uma tendência de diminuição, estatisticamente significante, dos níveis de ALP em todos os períodos tratados com FK506, sendo que com os níveis de cálcio apenas um aumento em 240 dias de tratamento, quando comparados com os grupos controles. Após 60, 180 e 240 dias de tratamento com FK506 não houve alterações em Vb e Vo. Após 120 dias de tratamento com FK506 houve sim evidente aumento de Vb associado a um aumento de Vo, mas não observado perda de osso alveolar. Houve ainda uma tendência de aumento nos níveis séricos de glicemia em curtos períodos (60 e 120 dias), com posterior tendência a normalidade nos períodos mais longos de tratamento com FK506. Assim, nós podemos concluir que o FK506 em longos períodos pode levar os efeitos deletérios sobre os tecidos gengivais e pode ser dependente da idade, mas não causaria efeitos negativos sobre o osso alveolar e nem ao cemento. E ainda em relação aos níveis séricos de glicemia, os efeitos negativos da terapia com FK506 também são dependentes do tempo

ABSTRACT

Tacrolimus (FK506) is an immunosuppressive drug in organ transplantation and it is also an alternative therapy used for transplant patients with either refractory graft rejection or intolerant to cyclosporine A (CsA), without the adverse effects frequently attributed to CsA therapy. Nevertheless there are not studies exploring the effects of long-term FK506 therapy on periodontium. It has been suggested that immunosuppressive therapy, mainly FK506, may be an important factor in the development of post-transplantation diabetes mellitus (PTDM). There is a lack of studies exploring the effects of a long-term FK506 on PTDM in animal's protocols. The objectives of the present study were to evaluate the effects of long-term therapy with FK506 on the gingival tissue, alveolar bone metabolism and cementum in rats and the deleterious glycemic effects of long-term therapy with FK506. Four groups, 10 rats each, were treated with FK506 injected subcutaneously in a daily dose of 1mg/Kg body weight. The chosen dose was sufficient to achieve therapeutic FK506 serum levels. The experimental periods were 60, 120, 180 and 240 days. Four groups, 10 rats each, were used as controls and received subcutaneous injection of saline solution during all periods. At the end of period experimental, blood collection was obtained and serum levels glycemic, calcium and alkaline phosphatase (ALP) were measured. After histological processing, the oral and connective tissue, as well as, volume densities of fibroblasts (Vf), collagen fibers (Vcf) and others structures (Vo) and the alveolar bone and cementum, as well as, volume densities of bone (Vb) and osteoclasts (Vo) were assessed at the region of the lower first molar. After 180 and 240 days of treatment with FK506, evident gingival overgrowth associated a significant increase of epithelium and connective tissue was observed. There was an increase of Vf, Vcf and Vo. There was a tendency of decrease of ALP level in all periods with FK506, statistically significant, but calcium serum level showed increase so long period (240 days) when compared with control group. After 60, 180 and 240 days of treatment with FK506 not observed Vb and Vo alterations. After 120 days of treatment with FK506, evident increase Vb associated a significant increase Vo was observed, but it was not showed alveolar bone loss. There was a tendency of increase of serum glycemia level in the initial periods (60 and 120 days). However, at 180 and 240 days, the serum glycemia were not statistically different from those of the control group. Within the limits of this experimental study, it can be concluded that the deleterious gingival effects of FK506 administration may be time and age related side effects and that have not the negative effects of FK506 administration long-term on the alveolar bone and cementum. It can be concluded that the deleterious glycemia effects of FK506 therapy may be time related side effects