Efetividade da escovação com diferentes agentes de limpeza de próteses na redução da viabilidade de biofilme in vitro da Candida albicans / Effectiveness of mechanical brushing with different denture cleansing agents in reducing in vitro Candida albicans biofilm viability

RESUMO

A Candida albicans tem sido considerada o principal agente etiológico da estomatite protética, uma das infecções mais comumente observadas em pacientes usuários de próteses removíveis. A adesão de C. albicans à superfície das próteses é o primeiro passo para o desenvolvimento da estomatite protética. Assim, uma adequada higienização das próteses é essencial para prevenir a formação de biofilme microbiano sobre a superfície protética e, conseqüentemente, o início e propagação desta infecção. O objetivo deste estudo foi avaliar a efetividade da escovação com diferentes soluções (água destilada, dentifrício, digluconato de clorexidina a 2%, hipoclorito de sódio a 1% e Polident fresh cleanse®) na redução da viabilidade de um biofilme maduro de C. albicans, desenvolvido sobre uma resina termopolimerizável para base de prótese. Para isso, 90 corpos-de-prova circulares foram confeccionados, esterilizados e inoculados com uma suspensão de 107 células/mL de C. albicans. Para a formação do biofilme, todos os corpos-de-prova foram incubados por 48 h a 37 °C sob agitação. A seguir, os corpos-de-prova foram aleatoriamente divididos (n=9) e individualmente submetidos à escovação ou exposição por 90 s nas diferentes soluções avaliadas. Os espécimes imersos em água destilada pelo mesmo período de tempo foram utilizados como controle positivo. Para verificar a efetividade da escovação e dos agentes de limpeza, os corpos-de-prova foram submetidos à avaliação da atividade metabólica das células não removidas de C. albicans por meio do teste do XTT. Os resultados obtidos foram analisados estatisticamente pelos testes de Mann-Whitney e Kruskal-Wallis (α=0.05). A escovação com todos os agentes de limpeza apresentou redução significativamente superior (p<0,0001) na viabilidade do biofilme quando comparada à exposição dos corpos-de-prova às soluções. Escovação e exposição em digluconato de clorexidina a 2% e escovação com hipoclorito de sódio a 1% resultaram em 100% de inativação do biofilme de C. albicans. Escovação e exposição nas demais soluções demonstraram, ao menos, 88% de redução na viabilidade celular (p<0,0001). O método de escovação associado ao uso dos agentes de limpeza digluconato de clorexidina a 2% e hipoclorito de sódio a 1% provou ser efetivo para inativar biofilme maduro de C. albicans aderido em resinas acrílicas para base de prótese

ABSTRACT

The adhesion of C. albicans to surfaces is the prerequisite for occurrence of denture stomatitis, a common disease diagnosed among denture wearers. Therefore, a strict routine of denture cleansing is essential to prevent biofilm formation on the acrylic denture surface and the onset of this infection. Thus, the aim of the current study was to investigate the effectiveness of combining toothbrushing and cleansing agents (dentifrice, 2% chlorhexidine gluconate, 1% sodium hypochlorite, and Polident fresh cleanse®) in inactivating C. albicans biofilm. Circular specimens (10 x 2 mm) of acrylic resin denture base material were made, sterilized, and individually inoculated with C. albicans (1x107 colony-forming units/mL). After incubation (37 °C/48 h), the specimens were divided into 10 experimental groups (n=9) 5 subjected to toothbrushing with different cleansing agents and 4 exposed to the cleansing agents without toothbrushing. Non–cleansed specimens were used as positive controls. The viability of cells was evaluated by XTT reduction method. Mann-Whitney and Kruskal-Wallis tests were used for comparative analysis between the two methods of cleansing and the cleansing agents, respectively (α=0.05). Toothbrushing with all agents was significantly more effective (p<0.0001) in reducing biofilm viability than exposure to the cleansing agents only. Exposure to all cleansing agents reduced significantly (p<0.0001) the biofilm viability, with 2% chlorhexidine gluconate being most effective (p<0.0001). Toothbrushing with 2% chlorhexidine gluconate and 1% sodium hypochlorite resulted in 100% inactivation of the biofilm. The use of cleansing agents as an adjunct to toothbrushing is an effective method to reduce C. albicans biofilm viability on denture base resins.