Determinação espectrofométrica e amperométrica de compostos fenólicos em urina humana, usando extrato parcialmente purificado de banana nanica (Musa acuminata) / Spectrophotometric and amperometric determination of compounds phenolics in human urine, utilizing purificated partialment extract of banana nanica (Musa acuminata)

RESUMO

Introdução - Extrato parcialmente purificado de banana nanica (Musa acuminata), melhor fonte de enzima Polifenol oxidase (PFO) [EC. 1.14.18.1] (Bonfim et al., 2000), foi estudado como material biocatalítico para a oxidação aeróbica dos substratos fenólicos usando um biossensor amperométrico com PFO imobilizada. Métodos - Foi estudada a extração da PFO dessa fonte (Bonfim et al., 2000), a purificação parcial desse extrato bruto usando sulfato de amônio (40%), que precipita o excesso de enzimas presentes nesse extrato com posterior diálise (Perone, 2004). A seguir foi determinada a atividade e a proteína total nos dois extratos. Um biossensor amperométrico foi construído usando 50 U de PFO proveniente do extrato parcialmente purificado de banana nanica (Perone, 2004), imobilizada sobre uma membrana de teflon (Celgard 2400) com o uso do reagente bifuncional glutaraldeído 2,5% m/V. Após secagem, essa membrana enzimática foi acoplada na extremidade de um eletrodo de oxigênio. Esse biossensor foi usado na determinação de compostos fenólicos em urina de indivíduos que consomem drogas metabolizando fenólicos, por amperometria e por espectrofotometria. Resultados - Nas amostras de urina observou-se que indivíduos que usam L-dopa apresentaram maior concentração de fenólicos que indivíduos que usam anfetaminas. Conclusões - A porcentagem de erro nas amostras estudadas foi menor que 3%, usando extrato bruto (Perone, 2003) e parcialmente purificado, usando o método padrão espectrofotométrico (Folin-Denis), mostrando a eficiência do método amperométrico empregado, com ou sem purificação enzimática.