Apoptose nas glândulas salivares humanas: avaliação de marcadores durante o processo de morfogênese da glândula / Apoptosis in human salivary glands: evaluation of markers during the gland morphogenesis

RESUMO

As glândulas salivares são estruturas formadas por um sistema de ductos e ácinos responsáveis por secretar saliva. Originadas pelo mecanismo de morfogênese, apresentam cinco estágios de diferenciação: pré-botão, botão inicial, pseudoglandular, canalicular e botão terminal. A compreensão da morfogênese das glândulas salivares é importante para o esclarecimento dos mecanismos de tumorigênese e os componentes das neoplasias derivadas dessas glândulas. Estudos demonstram que o processo de apoptose desempenha um papel importante na formação do lúmen durante a organogênese, sendo assim, este estudo propõe a avaliação da expressão das proteínas envolvidas no mecanismo de morte e proliferação celular durante o desenvolvimento das glândulas salivares por meio da técnica de imunoistoquímica destacando os marcadores BCL2, Survivina, Ki-67, PAR4, FAS, FASL, PHLDA1, Caspase-3 clivada, SPARC e MUC1. Adicionalmente foram avaliados alguns espécimes para as proteínas Caspase-3 total e Caspase-7. Para tanto foram selecionados 50 espécimes de glândulas salivares dissecadas de fetos humanos em diferentes estágios gestacionais, provenientes de abortos espontâneos, e coletados de diferentes locais da cavidade oral. Também foram incluídas 10 amostras de glândulas salivares adultas histologicamente normais provenientes de margens cirúrgicas para comparação com a expressão na glândula em desenvolvimento. As proteínas SPARC e Caspase-3 clivada não foram expressas no parênquima glandular. A proteína MUC1 foi positiva em padrão citoplasmático a partir da fase pseudoglandular nas regiões de abertura luminal primitiva. PHLDA1 foi observada principalmente no citoplasma e raras células com positividade nuclear em quase todas as fases do desenvolvimento, exceto no botão terminal

ABSTRACT

Salivary glands are structures formed by a system of ducts and acini responsible for secreting saliva. Salivary glands morphogenesis is divided into five differentiation stages: pre-bud, initial bud, pseudoglandular, canalicular and terminal bud. Understanding the morphogenesis of the salivary glands is important to clarify the mechanisms of tumorigenesis and the components of tumors originated in these glands. Studies show that the process of apoptosis plays an important role in the formation of the lumen during organogenesis. Therefore, in this study the expression of proteins involved in the mechanism of cell death and cellular proliferation was investigated during the development of salivary glands by immunohistochemistry using the markers BCL2, Survivin, Ki-67, PAR4, FAS, FASL, PHLDA1, cleaved Caspase-3, SPARC and MUC1. Additionally, some specimens were evaluated for total Caspase-3 and Caspase-7 proteins. For this purpose, 50 specimens of salivary glands dissected from fetuses in different gestational stages, from miscarriages, and collected from different sites of the oral cavity were selected. We also included 10 specimens of histologically normal adult salivary glands from surgical margins to compare with the expression during gland development. SPARC and cleaved Caspase-3 were not expressed in the glandular parenchyma. MUC1 protein was positive from the pseudoglandular stage in a cytoplasmic pattern in regions of early luminal opening. PHLDA1 was observed mainly in cytoplasmic pattern and rare nuclear positivity in all development phases, except in terminal bud. FAS and FASL protein were expressed, simultaneously, with membrane pattern in rare cells during glandular development. PAR4 showed positivity in all phases, except pre-acinar areas