Capacidad antioxidante y calidad post-descongelación del semen equino criopreservado con quercetina y ergotioneina / Antioxidant capacity and post-thaw quality of stallion semen cryopreserved with quercetin and ergothioneine

RESUMEN

Se evaluó la capacidad antioxidante y la calidad post-descongelación del semen equino criopreservado con quercetina y ergotioneina. Nueve eyaculados provenientes de tres caballos criollos colombianos se criopreservaron bajo tres tratamientos ergotioneina (100 pM), quercetina (100 pM) y control (sin antioxidante). Posteriormente a la descongelación se evaluaron los siguientes parámetros la capacidad antioxidante total (CAT) del semen mediante el ensayo del ácido 2,2'-azino-bis-[3-etilbenzotiazolina]-6-sulfónico (ABTS•+); la movilid ad total (MT); la movilidad progresiva (MP); la hiperactividad (HA) y las velocidades curvilínea (VCL), lineal (VSL) y media (VAP) mediante el sistema computarizado SCA ; además, la integridad estructural de la membrana y la integridad acrosómica por microscopia de fluorescencia mediante las sondas SYBR/IP y FITC/ PNA, respectivamente; la morfología mediante la tinción eosina-nigrosina y la integridad funcional de membrana a través de la prueba hipoosmótica (HOS). Se realizó el ajuste de modelos lineales generalizados (GLM) y la comparación de medias por Tukey. La CAT (pmol trolox/ml) del semen descongelado fue superior para la ergotioneina (4,0 ± 0,3) y la quercetina (3,9 ± 0,4), respecto del control (2,6 ± 1,5). Para la MT se encontró una media superior para la ergotioneina (70,3 ± 11,2 %), respecto a la quercetina (63 ± 10,5 %) y al control (66,1 ± 11,2 %) (P < 0,05). Para MP, HA, VCL, VSL y VAP, el tratamiento control presentó valores superiores a los tratamientos con antioxidantes (P < 0,05). Se concluye que la ergotioneina y la quercetina incrementan la CAT e influyen sobre la movilidad y la cinética post-descongelación del semen equino.

ABSTRACT

The aim of this study was to evaluate the antioxidant capacity and post-thaw quality of stallion semen cryopreserved with quercetin and ergothioneine. Nine ejaculates from three Colombian Creole horses were cryopreserved under three treatments ergothioneine (100 pM), quercetin (100 pM) and control (no antioxidant). Post-thaw were evaluated the parameters total antioxidant capacity (TAC) of semen through the acid test of azino 2,2'-bis[3-ethylbenzothiazoline]-6-sulfonic acid (ABTS•+); total motility (MT), progressive motility (MP), hyperactivity (HA) and curvilinear (VCL), linear (VSL) and average path (VAP) velocities by the computerized system SCA ; structural membrane integrity and acrosome integrity by fluorescence microscopy using SYBR / IP and FITC / PNA probes, respectively; morphology by eosinnigrosin staining and functional membrane integrity by hypoosmotic swelling test (HOS). The adjustment of generalized linear models (GLM) and comparison of means by Tukey was performed. The TAC (pmol trolox/ml) of thawed semen was higher for ergothioneine (4.0 ± 0.3) and quercetin (3.9 ± 0.4), compared to control (2.6 ± 1.5). For MT a higher average for ergothioneine (70.3 ± 11.2%) compared to quercetin (63 ± 10.5%) and control (66.1 ± 11.2%) was found (P < 0.05). For MP, HA, VCL, VSL and VAP, the control showed higher values compared to the antioxidant treatments (P < 0.05). It is concluded that ergothioneine and quercetin increased the TAC and have influence on post-thawed motility and kinetics of stallion semen.