Técnicas para evaluar la capacidad fagocítica, opsonica y bactericida del leucocito polimorfonuclear / Techniques to evaluate the phagocytic, opsonizing and bactericidal ability f the polymorphonuclear leukocyte

RESUMEN

Para estudiar la función in vitro del leucocito PMN se estandarizaron las técnicas inmunológicas de capacidad fagocítica, opsónica y bactericida. La capacidad fagocítica se midió en sangre total, incubando leucocitos del sujeto en estudios en presencia de su propio plasma con estafilococos aureus muertos y la actividad opsónica se determinó incubando células de un individuo sano con plasma del sujeto en estudio. Los frotis teñidos se leyeron al microscopio de luz, y los resultados se expresaron como índice fagocítico, esto es número de bacterias ingeridas por 100 PMN. La capacidad bactericida se estudió, incubando una suspensión de leucocitos con bacterias (E. coli) en rotación continua a 37-C, basada en la técnica de Quie y cols. Se tomaron alícuotas para recuento de colonias por dilución en placa a los tiempos 0,20, 60 y 120 minutos. Los resultados se expresaron como índice bactericida, esto es, número de bacterias vivas a los 120 minutos/número de bacterias vivas a los 20 min. Para optimizar las técnicas se analizaron los siguientes parámetros número de leucocitos/ml de sangre o suspensión, concentración y cepa de referencia de E. coli/ml de suspensión, período de incubación, reproducibilidad de la técnica, variabilidad intraindividual e interindividual y en el tiempo. Una vez estandarizados dichos parámetros, los índices de capacidad fagocítica y opsónica fueron de 9.2 ñ 0.85 y 8.1 ñ 0.6 (x ñ ESM), respectivamente. El índice promedio de la actividad bactericida fue de 0.14 ñ 0.05. Las pruebas fueron discriminatorias en pacientes con sospecha clínica de alteración de la capacidad funcional del leucocito