Clonación molecular de Ro/SSA de 60 kD

RESUMEN

Se identificaron 12 clonas del cDNA que codifica para el antígeno Ro de 60 KD, utilizando una biblioteca de cDNAs de bazo humano normal insertada en fagos gt11, sus productos de traducción inmovilizados en filtros recombinantes fueron reconocidos exclusivamente por un suero anti-Ro; otros sueros con diferentes especificidades, resultaron negativos. Dos de estas clonas fueron estudiadas con mayor detalle Ro-531 y Ro-832, ambas fueron amplificadas por PCR y solamente Ro-531 fue subclonada en el polylinker pBK-II; el análisis con enzimas de restricción reveló que el ingerto tiene una longitud aproximada de 1 kb. Por transcripción in vitro se sintetizó una sonda de cRNA que hibridó por Southern blot con el DNA de Ro-531, de los lisógenos Y1089/Ro.531, y de pBK-II/Ro.531, pero no con Ro-832. En síntesis, se ha aislado un fragmento que corresponde al 55 por ciento del gene, que codifica para el antígeno Ro de 60 KD(AU)**********ojo