Principios y aplicaciones de la reacción en cadena de la polimerasa / Principle and application of the chain reaction of the polymerase

RESUMEN

El descubrimiento de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), técnica para la amplificación de ácidos nucleicos, ha tenido un enorme impacto sobre áreas diversas, tanto de la investigación básica como de la investigación clínica. Desde su descubrimiento en 1985, los informes sobre una gran variedad de aplicaciones de la PCR han recibido mucha atención en la literatura médica y científica. Esta tecnología ha demostrado tener una gran aplicabilidad para el diagnóstico de enfermedades humanas, incluyendo áreas tan diversas como enfermedades infecciosas, desórdenes genéticos y cáncer. Este artículo presenta una amplia revisión de los principios de la PCR, que incluyen conceptos genéricos que deben manejarse cuando se use o se diseñe un ensayo basado en la PCR. También se discute la aplicación de tales ensayos para el diagnóstico de desórdenes genéticos y para el estudio de enfermedades infecciosas. En los últimos 10 años ha aumentado, de manera notable, la aplicación de herramientas de la biología molecular para el diagnóstico de las enfermedades humanas. Los ensayos con sondas de ADN están, ahora, disponibles comercialmente para la detección e identificación de una gran variedad de patógenos humanos, así como para el diagnóstico de desórdenes genéticos humanos. Una manifestación del rápido crecimiento de la tecnología del ADN, ha sido el desarrollo de técnicas para amplificar secuencias específicas de ácidos nucleicos. En la literatura, han sido descritos muchos métodos, que se enumeran en la tabla i. Una comparación de estos métodos ha sido el tema de una revisión frecuente. Entre ellos se destacan la reacción en cadena de la polimerasa, como la de mayor impacto, tanto como herramienta de investigación como de diagnóstico. El objetivo de este artículo es presentar una breve revisión de los principios y aplicaciones de la amplificación de PCR, que incluyen una discusión de la selección correcta de las secuencias en blanco, el diseño de los "primer" y los medios necesarios para llevar a cabo la técnica