Ultramicrometodo inmunocitoquimico. Titulacion de anticuerpos utilizados para el inmunofenotipaje celular

RESUMEN

Se describe el procedimiento para la titulacion de los anticuerpos primarios y los antisueros conjugados, que hizo posible la introduccion en el Instituto de Hematologia Inmunologia, de un ultrametodo inmunocitoquimico para el estudio del inmunofenotipo en enfermedades inmunologicas y en las hemopatias malignas. Este metodo emplea celulas no deshidratadas adheridas a laminas portaobjetostratadas con poli-lisina. Al determinar la dilucion de trabajo de 32 anticuerpos monoclonales y 3 policlonales, se observo que con la misma cantidad de estos reactivos se pueden realizar entre 5 y 100 veces mas determinaciones con respecto al metodo de inmunofluorescencia indirecta. Entre otras ventajas, este metodo permite realizar 21 determinaciones en una misma lamina portaobjeto, requiere una menor cantidad de celulas, los resultados se evaluan en un microscopio de luz visible y las colaboraciones no se desvanecen con el tiempo, lo que permite realizar estudios retrospectivos