Optimización del análisis de ácidos biliares séricos por método enzimático fluorométrico / Improvement of an enzymatic fluorometric assay for serum bile acids
Acta bioquím. clín. latinoam
;
30(2): 103-9, jun. 1996. ilus, tab
Artículo
en Español
| LILACS
| ID: lil-177469
RESUMEN
Con el objeto de optimizar la determinación fluorométrica de los ácidos biliares séricos (ABS) en cuanto a selectividad y sensibilidad, se desarrolló una metodología de preparación de muestra y preconcentración utilizando columnas de extracción en fase sólida (SPE-C18). Previa desproteinización del suero con acetonitrilo frío, la fase orgánica evaporada y reconstituida con acetonitrilo agua (370), se aplicó a una columna SPE-C18 y los ABS fueron eluidos con metanol. En el extractivo metanólico, evaporado a sequedad y reconstituido con metanol se dosaron los ABS por método enzimático fluorométrico empleando 3Ó-hidroxiesteroide deshidrogenasa, ß-NAD, diaforasa y resazurina. En la validación de la preparación de muestra se utilizó [24-14C] ácido glicocólico. La recuperación fue del 89,0 ñ 1,3 por ciento (SD), con DSR de 1,4 para n=9 (3 días). Se determinaron los ABS en sujetos controles, resultando un valor medio de 2,61 ñ 0,39 µM (SEM) (n=27). La metodología propuesta combina las siguientes ventajas aumento de la selectividad del método enzimático, eliminación de interferencias y preconcentración de los ABS liberados, previamente, de la unión a proteínas plasmáticas
Buscar en Google
Índice:
LILACS (Américas)
Asunto principal:
Acetonitrilos
/
Calibración
/
Ácidos y Sales Biliares
/
Metanol
/
Pruebas Enzimáticas Clínicas
/
Fluorometría
/
Ácido Glicoquenodesoxicólico
/
3-Hidroxiesteroide Deshidrogenasas
Tipo de estudio:
Estudio diagnóstico
Límite:
Humanos
Idioma:
Español
Revista:
Acta bioquím. clín. latinoam
Asunto de la revista:
Bioqu¡mica
/
Qu¡mica Cl¡nica
Año:
1996
Tipo del documento:
Artículo
Similares
MEDLINE
...
LILACS
LIS