Detección de Trypanosoma cruzi en muestras experimentales por el método de reacción en cadena de la ADN polimerasa / Detection of trypanosoma cruzi in experimental samples by means of DNA polymerase chain reaction method

RESUMEN

La enfermedad de Chagas (tripanosomiasis Americana) afecta a más de 20 millones de personas en América. El 30 por ciento de los infectados desarrollan enfermedad crónica, miocardiopatía dilatada, sin tratamiento efectivo. En México el 40 por ciento de los sujetos con miocardioatía dilatada tienen anticuerpos contra Trypanosoma cruzi. En la fase crónica la parasitemia es esporádica y escasa; no es posible detectar el parásito por métodos directos. Comunicamos un método capaz de detectar T. cruzi, sebsible y específico. Dos oligonucleótidos (KNs1 y KNS2), diseñados a partir de la secuencia de ADN de minicírculos de cinetoplasto, se usaron para amplificar la región hipervariable por el método de la reacción en cadena de la ADN polimerasa (PCR). Se logró detectar el equivalente de 0.8 a 1.5 moléculas de minicírculo o 1/12,000 de parásito. AI aplicar el método a muestras de ADN de tejidos de ratones infectados con parásito, se amplificó un producto reconocido por una sonda específica para minicírculos. Estos resultados se correlacionan con estudios inmunohistoquímicos que muestran la presencia tisular del parásito a varios tiempos estudiados. El método desarrollado puede tener aplicación en estudios clínicos, epidemiológicos de campo y de vigilancia en bancos de sangre.