Obtención de anticuerpos y desarrollo de un inmunoensayo para la detección de proteínas de Escherichia coli en preparaciones de interferón Y humano recombinante / Obtainment of polyspecific antibodies against proteins of an Escherichia coli strain expressing human Y interferon and development of an immunoassay

RESUMEN

Se describe la obtención de antisueros poliespecíficos dirigidos contra las proteínas de la cepa de Escherichia coli (W3110) empleada en la producción del interferón gamma humano recombinante (IFN gamma hum.rec.), por el método de inmunización en cascada. Para esto, 3 conejos fueron inmunizados inicialmente con una preparación de proteínas de E. coli (pPEc) obtenida a través de un proceso "en blanco" (proceso similar al realizado en la producción de la proteína recombinante, pero en ausencia de esta). Posteriormente se realizaron inmunizaciones sucesivas con las proteínas menos inmunogénicas, las cuales fueron obtenidas pasando la pPEc por una columna en la cual se encontraban acoplados anticuerpos purificados del suero de animales previamente inmunizados con la misma. Se demostró por "Western Blotting" que con este método se logró obtener antisueros de amplio espectro los cuales reconocen a la mayoría de las proteínas de la cepa huésped. Estos antisueros fueron empleados en el control de calidad de la proteína recombinante por medio de un ELISA de captura para la valoración de antígenos. El límite de detección fue de 3,125 ng/ml y el de cuantificación 6,25 ng/ml