Inmunodiagnóstico de fasciolosis bovina mediante Elisa y Western Blot / Immunodiagnosis of bovine fasciolosis by Elisa and Western Blot

RESUMEN

Se evaluó y caracterizó la respuesta inmune humoral de bovinos naturalmente infectados con fasciola hepatica frente a un extracto total de antígenos de excreción-secreción (E-S) y a una fracción antigénica semipurificada cromatográficamente (<30 kDa), seleccionada previamente por su eficiencia diagnóstica en otras especies. Ambos preparados antigénicos fueron analizados mediante ELISA en microplaca y electroforesis en geles de poliacrilamida en condición de denaturación (SDS-PAGE) y posterior inmunoelectrotransferencia enzimática o Western blot. Para ello se emplearon 52 sueron de bovinos con fasciolosis comprobada mediante examen post mortem, 18 sueros de animales sin la infección y 48 sueros de vacunos infectados con hidatidosis, pero sin fasciolosis. La sensibilidad y especificidad obtenidas en el ELISA con el extracto crudo E-S fueon de 53 por ciento y 100 por ciento, respectivamente, en tanto que con la fraccion semipurificada a igual especificidad (100 por ciento) se presentó una sensibilidad mayor (90 por ciento). A través de Western blot, empleando el extracto antigénico total E-S hubo un reconocimiento específico de bandas correspondientes a los 14,22,27-29 y 37-38 kDa. Las bandas de 37-38 y 27-29 kDa destacaron por su sensibilidad y frecuencia, identificadas por el 90 por ciento y 100 por ciento de los infectados, respectivamente. Con el antígeno semipurificado, se evidenció una banda polipeptídica de 28-30 kDa, reconocida por todos los sueros con fasciolosis. Los resultados demuestran, por un lado, la existencia de diversas fracciones polipeptídicas que potencialmente pueden ser promisorias en el inmunodiagnóstico de fasciolosis bovina