Detecçäo de progenitores hemopoiéticos eritróides (BFU-E e CFU-E) em medula óssea, sangue de cordäo umbilical e sangue periférico usando rh-EPO / Detection of erythroid haemopoietic progenitors (BFU-E and CFU-E) in bone marrow, peripheral blood, and umbilical-cord blood using rh-EPO

RESUMO

A detecçäo de progenitores hemopoiéticos da linhagem eritróide, BFU-E e CFU-E, envolveu a cultura de células mononucleares hemopoiéticas obtidas de medula óssea, sangue periférico e sangue de cordäo umbilical em meio de IMDM, suplementado com antibióticos, soro bovino fetal 25 porcento, soroalbumina bovina 1 porcento, meio condicionado da linhagem celular 5637 (como fonte exogena de fatores de crescimento) 1 porcento e adiçäo de eritropoietina humana recombinante em matriz semi-sólida (metilcelulose). Usando-se a técnica, populaçöes distintas de células progenitoras de linhagem eritróide puderam ser detectadas e definidas em sua linhagem pela capacidade de orientar colônias de aspecto característico, após um período de incubaçäo de 14-20 dias, à 37§C, em atmosfera úmida, com 5-19 porcento de CO2. Os tipos de colônias de BFU-E e CFU-E observados foram de tamanho variado, apresentado coloraçäo vermelha em tons variáveis. Células hemopoiéticas constituintes da linhagem eritróide, em diferentes graus de maturaçäo, foram morfologicamente identificadas após coloraçäo panóptica. A frequência de colônias de BFU-E e CFU-E observada, em nossos estudos foram, respectivamente 33 mais ou menos 4,4 e 30,3 mais ou menos 5,4 para medula óssea; 12,7 mais ou menos 4,3 e 9,3 e 9,3 mais ou menos 1,5 para sangue periférico; 26,6 mais ou menos 8,7 e 25,6 mais ou menos 11 para sangue de cordäo umbilical