Geraçäo e caracterizaçäo do camundongo nocaute para o receptor B1 de cininas / Generation and characterization of kinin B1 receptor knockout mice

RESUMO

Com o objetivo de investigar a função biológica do receptor B1 das cininas geramos camundongos geneticamente modificados deficientes para este receptor, pelo método de recombinação homóloga. A deleção do gene foi verificada no DNA genômico dos animais nocautes e também pela ausência de expressão do RNAm do receptor no íleo, estômago e rim mesmo após tratamento com LPS, que induz a expressão do gene. Além disso, também foi verificada a perda de funcionalidade do agonista do receptor B1, Des-Arg9-BK na preparações de íleo, útero e estômago isolados. Os animais nocautes para o receptor B1 são férteis, viáveis e normotensos, sendo entretanto a presença do receptor B1 essencial para o efeito hipotensor promovido pelo LPS no choque séptico. Quando comparados aos animais selvagens, os camundongos nocautes são maiores e mais pesados ao nascimento, e esse aumento de massa mantém-se pelo menos até o terceiro mês de vida. Foi ainda verificado aumento de ingestão alimentar absoluta e uma diminuição de ingestão relativa, indicando um maior aproveitamento dos nutrientes, ou menor gasto calórico pelos animais nocautes. Os camundongos nocautes apresentaram maior atividade das enzimas liberadoras de óxido nítrico, podendo ser um dos fatores responsáveis pelas diferenças na ingestão alimentar. A indução de um processo inflamatório crônico pela administração de baixas doses de LPS, seguida de uma dose letal produziu o efeito de tolerância tanto nos animais selvagens como nos nocautes, com diminuição de celularidade da medula óssea. Entretanto, diferentemente dos animais selvagens que responderam ao tratamento com aumento no sangue de neutrófilos maduros e jovens, os nocautes não exibiram aumento de neutrófilos circulantes, Ambos os grupos apresentaram anemia após as administrações de LPS sendo essa mais acentuada nos nocautes. O baço é o principal órgão de destruição das hemácias e de grande importância para a diminuição dos neutrófilos circulantes. Os animais nocautes apresentam aumento da massa do baço em condições de normalidade e essa diferença se acentua na tolerância, podendo estar este fenômeno envolvido nos distúrbios hematológicos observados nos animais nocautes após o tratamento com LPS. A importância do receptor B1 na migração de neutrófilos foi avaliada pela indução de uma inflamação peritonial por caseinato, sendo observada uma menor quantidade de neutrófilos na cavidade abdominal dos animais nocautes após este tratamento. Além ...(au)