Método imunocitoquímico para a identificaçäo de amastigotas do Trypanosoma cruzi em cortes histológicos de rotina / Inmunoenzyme method for identification of Trypanosoma cruzi amastigotes in routine histological sections

RESUMO

A técnica da peroxidase antiperoxidase foi aplicada para a identificaçäo de amastigotas do T. cruzi em cortes histológicos de rotina. Os tecidos foram obtidos de pacientes chagásicos crônicos e de animais na fase aguda da infecçäo chagásica. Anti-soros específicos produzidos em coelho contra as cepas CL, Y e Ernane do T. cruzi foram utilizados como reagentes primários na técnica imunocitoquímica. Soro de coelho normal foi utilizado como controle negativo e culturas de macrófagos peritoniais de camundongos infectados com tripomastigotas e apresentando abundantes amastigotas intracelulares foram utilizadas como controles positivos. Coloraçäo positiva ocorreu especificamente nos amastigotas intra e extracelulares em todos os tecidos testados com os anti-soros as três diferentes cepas do T. cruzi. Os amastigotas isolados ou formando ninhos intracelulares tornaram-se facilmente identificáveis nas preparaçöes histológicas utilizando-se o pequeno ou médio aumento do microscópio. O presente método aumenta a probabilidade do diagnóstico do parasitismo na doença de Chagas, e evita confundir-se amastigotas com outros microrganismos morfologicamente semelhantes