Chromatographic separation of carotenoids

RESUMO

Devido ao longo sistema de duplas ligaçoes conjugadas, os carotenóides sâo altamente reativos e consequentemente instáveis Várias precauçoes, tais como conduçao da análise no menor tempo possível, exclusao de oxigênio, proteçao contra luz, uso de baixa temperatura e de antioxidantes, devem entâo serem tomadas durante o isolamento e cromatografia. Os alimentos, preferencialmente in natura, sâo homogenizados, e imediatamente os carotenóides sao extraídos com solventes orgânicos. A saponificaçâo é empregada com o objetivo de hidrolisar os ésteres de carotenóides, promover retirada de lipídeos e destruiçâo de clorofila. Esta etapa opcional facilita a posterior separaçao, identificaçao e quantificaçao dos carotenóides. Os carotenóides sao separados por cromatografia em coluna, cromatografia em camada delgada ou cromatografia líquida de alta eficiencia (HPLC), tanto em escala analítica como preparativa. Várias fases estacionárias podem ser empregrados tais como alumina, sílica, Ca(OH)2, MgO e fase reserva (C18 e C30). Os principais fatores que devem ser considerados na escolha do método cromatográfico sao quantidade de amostra, composiçao de carotenóides, pureza, resoluçao e velocidade necessárias. Serao apresentados e discutidos exemplos de separaçao de carotenóides em diversas fases estacionárias