Contribuiçäo ao conhecimento das lesöes de estocagem: estudo do sistema de óxido-reduçäo glutationa dependente em eritrócitos coletados em CPDA-1 / Contribution on knowledge of storage lesions: glutathione anti-oxidant system study

RESUMO

A presente investigaçäo teve como objetivo o estudo do sistema de óxido-reduçäo glutationa-dependente em 34 CGV coletados em CPDA-1, nos dias 0 e 35 de estocagem. Amostras de 12 CGV foram examinadas logo após a coleta em heparina e CPDA-1, constituindo o grupo dia 0. Os valores do dia 0 foram considerados controles para 12 CGV examinados no 35§ dia de estocagem. Foram efetuados testes de reduçäo da MetaHb pelo Am (atividade G6PD) e pela CIS (atividade GSSG-Rd), dosagens de GSHt, GSSG, MDA total e eritrocitário, MetHb e Hb plasmática. Os resultados do dia 0 demonstraram preservaçäo da capacidade antioxidante da via das pentoses. Foi também observada uma lesäo incipiente da membrana, principalmente após centrifugaçäo refrigerada em GV heparinizados. No dia 35, constatou-se atividade deficiente da G6PD, deficiência de GSSG-Rd (funcional, dependente da atividade G6PD), diminuiçäo da GSHt, da GSSG, manutençäo da relaçäo [GHS] / [GSSG], refletindo uma lentidäo na capacidade antioxidante da vida das pentoses. Pelos altos níveis de Hb plasmática, ficou evidenciada uma importante lesäo da membrana, associada entretanto, a níveis pouco elevados de MDA. Estes CGC que sofreram manipulaçäo eventual e freqüênte, durante a estocagem, foram comparados a 4 unidades de CGV estocados imóveis pelo mesmo período, para GSHt e atividades G6PD e GSSG-Rd. As unidades agitadadas apresentaram o dobro das taxas de GSHt, sugerindo que a agitaçäo favorece maior síntetse e também maior reciclagem da GSH. A atividade G6PD foi menor, embora näo significante, nas unidades agitadas, provavelmente pela oxidaçäo dos seus grupamentos SH, pois um maior fluxo de oxigênio ocorre no interior da bolsa. A GSSG-Rd acompanhou funcionalmente a deficiência em G6PD. Foram estudados 10 CGV estocados imóveis por 35 dias, 6 de 150 ml e 4 de 300 ml, comparando-se amostras de GV do topo, centro, fundo da bolsa e após mistura completa do conteúdo, para alguns índices hematimétricos, GSHt e atividades G6PD e GSSG-Rd. A camada do fundo dos CGV demonstrou ser a mais compacta e menos preservada, com GV de menor VCM, maior CHCM e menores níveis de GSHt. A camada do centro foi a melhor preservada, tanto quanto a índices hematimétricos, quanto a taxas de regeneraçäo de GSHt e níveis mais homogêneos de G6PD. Nestas unidades imóveis, parece ocorrer um "choque metabólico", quando da mistura dos GV com plasma, proteases, oxigênio e espécies oxigênio reativas, pois a regeneraçäo da GSHt é semelhante...