Apoptose no tumor venéreo transmissível canino: características morfológicas e evidenciaçäo bioquímica / Apoptosis in the canine transmissible venereal tumor: morphological features and biochemical evidence

RESUMO

Fragmentos de tumor venéreo transmissível canino (TVTC) de ocorrência natural, com localizaçäo genital, foram obtidos de cinco animais, machos, adultos, sem raça definida. "Imprints" da superfície de corte em lâmina de microscopia foram fixadas em metanol, coradas pelo Giemsa e submetidas à avaliaçäo citológica. Os fragmentos foram fixados e processados rotineiramente para inclusäo em parafina e coloraçäo com HE e Shorr, para confirmaçäo histológica do tumor e identificaçäo da apoptose. Outros fragmentos foram envolvidos com papel alumínio e acondicionados dentro de frascos de vidro em gelo seco, para serem processados no mesmo dia, visando à extraçäo de DNA e eletroforese em gel de agarose. Análises cito e histológica do TVTC mostraram a distribuiçäo e o padräo celular e tecidual característicos dessa neoplasia, sobressaindo-se a presença de vacúolos claros, bem definidos no citoplasma à análise citológica. Pela coloraçäo com Shorr pôde-se identificar células retraídas, com aumento da acidofilia citoplasmática e condensaçäo da cromatina nuclear, às vezes com fragmentaçäo do núcleo e das células, caracterizando apoptose. A coloraçäo pelo Shorr mostrou ser mais eficiente na distinçäo de células apoptóticas do que a coloraçäo por HE. A eletroforese de DNA em gel de agarose demonstrou a fragmentaçäo internucleossômica do genoma, que pôde ser reconhecida pelo clássico "padräo em escada"