Genotyping of Kell, Duffy, kidd and RHD in patients with B Thalassemia

RESUMO

A determinaçäo dos fenótipos Rh, Kell, Duffy e Kidd, associada ao ABO é utilizada para prevenir a aloimunizaçäo a antígenos eritrocitários e participam também no processo de identificaçäo de anticorpos nos pacientes com B talassemia. Todavia, a fenotipagem desses pacientes é trabalhosa e de difícil interpretaçäo. Nesta situaçäo, deve ser avaliada uma alternativa ao teste de hemaglutinaçäo para determinar o padräo antigênico dos pacientes. Utilizamos para tal fim o método PCR-RFLP. Foram preparados DNAs de 50 pacientes com Btalassemia que haviam sido anteriormente fenotipados pela hamglutinaçäo e testados para Kell, Kidd, Duffy/GATA mutaçäo por PCR-RFLP. RHD/näo-D foi analisado pelo tamanho do produto, do PCR associado à seqüência do gene RHD no intron 4 e exon 10/3' UTR. Os testes de genotipagem foram realizados sem o conhecimento dos resultados dos fenótipos. Para os RHD/näo-D, 47 foram RHD+ e RHD+/RHCE+, e 3 foram RHD- e RHD-/RHCE+. Para o Kell, 48 kk foram K2K2 e 2 Kk foram K1K2. Para o Duffy, das 44 amostras que haviam sido normais, GATA box, 8 Fy(a+b-)foram FYA/FYA, 15Fy(a+b-) foram FYB/FYB; e 19 Fy(a+b+) foram FYA/FYB; das outras 4 amostras, 3 foram FYA/FYB; homozigoto GATA mutaçäo. Duas amostras fenotipadas como Fy(a+b-), que eram normais GATA, apresentavam as mutaçöes 265T/298a e 2 amostras fenotipadas como Fy(a+b+) haviam sido genotipadas como FYA/FYB. Para o Kidd, 15Jk(a+b+) foram JKA/JKA, 12jk(aa-b+) foram JKB/JKB, e 20 jk(a+b+) haviam sido genotipadas como JKB/JKB. A genotipagem é mais acurada que a fenotipagem para determinaçäo de grupos sangüíneos em pacientes portadores de B talassemia poli transfundidos. A genotipagem nesses pacientes pode ser importante para selecionar hemácias antigenicamente negativas para transfusäo de glóbulos vermelhos.