Padronizaçäo da técnica antigenemia para a detecçäo do citomegalovirus / Padronization of antigenemia metodology for detection of citomegalovirus

RESUMO

Antigenemia para citomegalovirus (CMV) é um importante marcador de evoluçäo de doença e eficácia de tratamento em pacientes imunocomprometidos. O objetivo desse estudo foi comparar diferentes técnicas de processamentos e de imunomarcaçäo para a detecçäo da proteína da matrix do CMV pp65 em leucócitos do sangue periférico. Amostras de sangue coletadas de pacientes submetidos ao transplante de medula óssea (TMO) foram processadas e imunomarcadas por diferentes metodologias. Separou-se leucócitos de sangue periférico, utilizando-se duas técnicas, sedimentaçäo espontânea a 37§C (Processamento 1) e a sedimentaçäo com Dextran (Processamento 2), após a lise eritrocitária procedeu-se a contagem dos leucócitos, ajuste da densidade celular e o preparo das lâminas que continham (2x10 a quinta potência) células, por citocentrifugaçäo. As lâminas, obtidas através das diferentes técnicas de processamentos, foram coradas, utilizando-se a metodologia de Imunoperoxidase (IP) e os resultados obtidos foram analisados de acordo com parâmetros qualitativos e quantitativos. Também avaliou-se duas diferentes técnicas de imunomarcaçäo IFI Imunofluorescência Indireta) e IP onde comparou-se o número de células positivas. Obteve-se lâminas de melhor qualidade pelo processamento 1 e um maior número de célu;as positivas com técnica de IP