Aplicação do microarray de cDNA para identificação de genes inflamatórios diferencialmente expressos na polipose nasal / cDNA microarray to identify differentially inflammatory genes in nasal polyposis

RESUMO

Objetivo: Identificar genes inflamatórios diferencialmente expressos na polipose nasal não alérgica, pela técnica do microarray de cDNA. Métodos: Utilizou-se a técnica do microarray de cDNA para identificar diferenças de expressão para 96 genes inflamatórios entre o pólipo e a mucosa nasal adjacente em 21 pacientes portadores de polipose nasal não alérgica. O RNA total foi isolado de cada amostra separadamente e agrupado em quantidades iguais em dois pools (pólipo e mucosa nasal adjacente). Preparou-se a sonda de cDNA com 20 gg do RNA total através da reação de transcrição reversa. Realizou-se a hibridação do CDNA marcado radioativamente com as membranas para cada grupo separadamente. Utilizou-se o RTPCR para a validação do cDNA após normalização, para os seguintes genes TNF,IL5,IL9,FIGF e TGF-1. Resultados: Dos 96 genes estudados, 37 mostraram diferenças de expressão entre o pólipo e mucosa adjacente. A expressão dos 37 genes foi maior na mucosa nasal adjacente do que no pólipo. O RT-PCR confirmou os resultados do cDNA e mostrou que existe um desequilíbrio entre a IL5 e TGF-1 entre o pólipo e a mucosa nasal adjacente. Conclusões: O microarray de cDNA consiste em um método eficaz para a identificação de genes com diferenças de expressão. Existe um desequilíbrio da IL5 e do TGF-1 entre o pólipo e mucosa nasal adjacente ao pólipo. A maior expressão do TGF-1 na mucosa nasal adjacente ao pólipo associada à baixa expressão desta citocina no pólipo reflete o seu papel protetor no desenvolvimento do pólipo...