Estudo de variabilidade fenotípica e genotípica de cepas de Aspergillus Seção Circumdati isolados de insetos / Study of fenotipic and genotipic variability of cepas of Aspergillus Seção Circumdati isolated of insects

RESUMO

Sessenta e quatro cepas de Aspergillus ochraceus, A. petrakii, A. sclerotiorum e A. sulphureus (Seção Circumdati) isoladas de insetos, foram analisadas quanto a sua morfologia, perfis isoenzimáticos, perfis de RAPD-PCR e produção de ocratoxinas. Com base na análise morfológica, as cepas foram identificadas e classificadas como espécies distintas. Poucas diferenças foram evidenciadas nas espécies Aspergillus sclerotiorum e A. sulphureus quando comparadas às descrições encontradas na literatura, enquanto que nas espécies A. ochraceus e A. petrakii nenhuma diferença foi observada. As análises cromatográficas demonstraram que 40 das 64 cepas foram positivas para a produção de ocratoxinas, sendo a ocratoxina C a mais freqüente entre os isolados. Somente a cepa padrão da espécie A. ochraceus apresentou produção para ocratoxina A. Uma nova abordagem nesta Seção foi o uso da técnica de eletroforese de isoenzimas neste estudo permitiu a caracterização das cepas analisadas, além de inferências taxonômicas, genéticas e fisiológicas. Nesta análiseobservamos que as 4 espécies aparecem formando diferentes grupos, porém os representantes de Aspergillus ochraceus formam 2 subgrupos também distintos, corroborando com dados já existentes na literatura. Foram encontrados alelos diagnósticos para as espécies A. sclerotiorum (GPI-1) e A. sulphureus (FK-1 e ACP-2) e alelos diagnósticos para a detecção da produção de ocratoxinas de A. petrakii (EST-6) e A. sulphureus (ACP-4). A análise molecular do DNA genômico das cepas pela reação de RAPD-PCR demonstrou que o ôprimerö OPA-03 é capaz de amplificar todas as cepas das 4 espécies. Foram encontrados marcadores moleculares espécie-específicos para os representantes de A. petrakii e A. sulphureus. As técnicas de eletroforese de isoenzimas e RAPD-PCR são eficientes na caracterização de espécimes de A. ochraceus, A. petrakii, A. sclerotiorum e A. sulphureus e os resultados obtidos são úteis na identificação e classificaçãotaxonômica da Seção Circumdati , além de fornecer subsídios para futuros estudos moleculares, genéticos e taxonômicos.