Trypanosoma cruzi: alterações nos níveis de cálcio em cardiomiócitos induzidas pela invasão do parasita e efeito in vitro e in vivo do bifosfonato risedronato / Trypanosoma cruzi: alterations in the calcium levels in induced cardiac cells for the invasion of the parasite and effect in vitro and in vivo of the biphosphonate risedronate

RESUMO

Investigamos a participação de cálcio na invasão do Trypanosoma cruzi em cardiomiócitos acoplados e exibindo contração espontânea. Utilizando fura 2-AM foi possível observar aumentos transitórios (picos) ou sustentados no cálcio da célula hospedeira durante o processo de invasão quando do contato ou da adesão do parasito ao sarcolema. Níveis de inibição de 41,7 e 72 por cento foram observados quando o cálcio intracelular foi reduzido pelo tratamento dos cardiomiócitos com A23187 0,5µM + EGTA 2,5 OU 5,0mM respectivamente. A redução extracelular do íon com EGTA 2,5mM e 5mM, inibiu a invasão em 15,2 e 35,1 por centoenquanto que o tratamento apenas com A23187 0,5µM não apresentou efeito significtivo na inibição da invasão (17 por cento)...Bisfosfonatos estão em uso clínico no tratamento de doenças ósseas re-absortivas e bloqueiam a biossíntese de poli-isoprenóides ao nível da farnesil-pirofosfato sintase. Ris induziu um efeito inibitório dose-dependente sobre a proliferação de epimastigotas, levando a lise celular, sendotal efeito associado à depleção de esteróis endógenos do parasito. Danos ultra-estruturais sobre mitocôndria, reservosomos, cinetoplasto e aparecimento de vacúolos autofágicos foram observados em epimastigotas. Ris apresentou efeitos seletivo sobre amastigotas intracelulares na concentração de 100 µM, capaz de inibir completamente seu desenvolvimento no interior de cardiomiócitos erradicando assim a infecção das culturas. Este bisfosfonato induziu um drástico efeito sobre parasitas intracelulares observado ao nível ultra-estrutural e bloqueou a diferenciação de amastigota para tripomastigota, levando a célula hopedeira a recuparar totalmente sua estrutura e atividad. In vivo, quando animais infectados com 10³tripomastigotas foram tratados por via endovenosa 24h pós infecção, Ris na concentração de 1mg/kg.d administrado por 7 dias, induziu >90 por cento de inibição da parasitemia e aumentou (p<0.001) a sobrevida dos animais tratados. A parasitemia não aumentou após o fim do tratamento indicando atividade tripanocida mais que tripanostática. Ocorreu desaparecimento quase que completo dos ninhos de amastigotas no coração dos animais tratados. No entanto, não observamos cura parasitológica, provavelmente devido ao curto perpiodo de tratamento. Ris foi bem tolerado por via endovenosa e acreditamos que é um composto promissor para o desenvolvimento de novas drogas anti-T. cruzi.