Validação do método espectrofotométrico para quantificação do aminoácido hidroxiprolina em conservas de carnes / Spectrophotometric method validation for hydroxyproline amino acid determination in canned meat

RESUMO

A validação tem por objetivo assegurar que o método analítico é adequado ao que se propõe quantificar e pode ser realizada por estudos interlaboratoriais ou intralaboratoriais. A exatidão é um dos principais fatores a serem estabelecidos na validação, podendo ser avaliada com o uso de materiais de referência. Os métodos espectrofotométricos são os mais utilizados na quantificação do aminoácido hidroxiprolina na rotina de análise de tecido colageno devido à precisão, simplicidade, baixo custo e rapidez. Este trabalho teve por objetivo validar intralaboratorialmente a metodologia espectrofotométrica oficial da AOAC (Association of Official Analytical Chemistis) para quantificação do aminoácido hidroxiprolina utilizando amostras de conservas de carne de estudo interlaboratorial FAPAS/MAFF/UK (Food Analysis Perfomance Assessment Scheme/ Ministry of Agriculture, Fishries and Food / United Kingdom) como material de referência. A curva de padronização apresentou linearidade (r=0,9991) na faixa utilizada. O método revelou limite de quantificação de hidroprolina na alíquota de análise de 0,030 mg/mL com desvio padrão relativo de 6,5% e na amostra 0,0075g/100g. As taxas de recuperação variaram de 90 a 95% determinadas em 3 níveis de concentração da amostra FAPAS fortificada. As taxas de repetitividade obtiveram CV (coeficiente de variação) inferiores a 4%. A participação em nove séries do programa interlaboratorial de proficiência FAPAS/MAFF/UK no período de 1997 a 2003 revelou boa exatidão com resultados satisfatórios em 89% das análises. A metodologia apresentou-se eficiente quando aplicada a conservas de carne, podendo ser considerada validada intralaboratorialmente