Vacinação genética utilizando genes de Trypanosoma cruzi em linhagem de camundongos altamente suscetível à infecção / Genetic vaccination using genes of Trypanosoma cruzi in a strain of mice highly susceptible to infection

RESUMO

Diversos trabalhos demonstraram que camundongos BALB/c ou C57BL/6 imunizados com plasmídios que contém genes do Trypanosoma cruzi desenvolveram resposta imune específica e imunidade protetora contra infecção parasitária letal. Nossos resultados anteriores mostraram que camundongos A/Sn altamente suscetíveis a infecção pelo T. cruzi, vacinados com DNA plasmidial contendo o gene que codifica a trans-sialidase apresentaram uma redução no pico da parasitemia após a infecção experimental. Entretanto, após o desafio com as formas tripomastigotas sangüíneas da cepa Y, estes animais foram incapazes de sobreviver. 0 objetivo inicial desta tese foi tentar aumentar a resposta imune do tipo 1 em camundongos A/Sn utilizando protocolos de imunização combinados com DNA plasmidal e proteína recombinante. Para tal, camundongos A/Sn foram imunizados com: i) o plasmídio p154/13 que contém o gene que codifica a trans-sialidase (TS) de T cruzi, ii) com a proteína recombinante TS em alum, iii) simultaneamente com o plasmídio p154/13 e com a proteína recombinante TS, ou iv) seqüencialmente com o plasmídio p154/13 seguido da proteína recombinante TS. Após a análise da resposta imune humoral e celular, observamos que camundongos A/Sn imunizados com o plasmídio p154/13 desenvolveram uma resposta imune predominante do tipo 1. Em contraste, a imunização com a proteína recombinante TS acoplada em alum gerou uma típica resposta imune do tipo 2. A administração simultânea do plasmídio p154/13 e proteína recombinante TS também induziu uma resposta imune predominante do tipo 2. Porém, a imunização seqüencial denominada "DNA-priming protein-boosting", que consistiu de duas doses iniciais do plasmídio p154/13 seguida de injeções de reforço com a proteína recombinante TS, melhorou significativamente a resposta imune específica do tipo 1, determinado pela drástica redução da relação das subclasses de imunoglobulina IgG1/IgG2a no soro dos camundongos e pelo aumento da produção in vitro de IFN- por células T CD4 dos camundongos imunizados. Nossas observações confirmaram e estenderam dados prévios que mostraram que o protocolo "DNA-priming protein-boosting" pode ser uma estratégia geral para aumentar resposta imune do tipo 1 das vacinas de MA. Após a infecção com T cruzi, nenhuma melhoria significativa da imunidade protetora foi observada nestes camundongos quando comparados aos camundongos que só receberam o DNA plasmidial...(au)