Caracterización parcial de los genes codificantes para la proteína de choque térmico HSP70 de Trypanosoma rangeli / Partial characterization of coding genes for Trypanosoma rangeli HSP70

RESUMEN

Objetivo: dada la relevancia inmunológica de la región amino terminal de la proteína HSP70 de la Tripanosoma cruzi, así como el hecho de que la inmunización de ratones con Tripanosoma rangeli protege a los animales contra la infección por T. cruzi, el presente trabajo se centró en el aislamiento y caracterización molecular del fragmento homólogo en T. rangeli. Materiales y métodos: la región amino terminal del gen codificante para la HSP70 de T. rangeli fue amplificada mediante PCR utilizando los oligonucleotidos TrHSP70f/R2, diseñados con base en la secuencia homóloga de T. cruzi. El fragmento amplificado fue purificado, clonado en el vector pGEM® –Teasy (Promega) y secuenciado en un 373 Automatic DNA sequencer (Applied Biosystems). La organización genómica de los genes HSP70 se determino mediante ensayos de “Southern blot” y PFGE. Resultados: los genes HSP70 de T. rangeli tienen un tamaño aproximado de 2.400 pb, se encuentran repetidos en tandem y se localizan en un cromosoma de 1.030 y 1.090 Kb en la cepa H14, KP1(+) y de 1.100 KB en la cepa Tre, KP1 (-). La secuencia de nucleótidos correspondiente a la región amino terminal de la proteína tiene una identidad del 99 por ciento entre las cepas H14 y Tre de T. rangeli y del 94 por ciento entre éstas y T. cruzi, preséntando además polimorfismos para diversas enzimas de restricción. La secuencia de amiácidos de dicha región entre ambos parásitos tiene una identidad del 95 por ciento. Conclusiones: el extremo amino terminal de las proteínas HSP70 de T. cruzi y T. rangeli guardan una elevada identidad de secuencia lo que abre un camino a la posible utilización de la HSP70 de T. rangeli en inmunoterapia. Asimismo y dado que en esta región se localizan epítopes B y T inductores de respuesta inmune en pacientes chagásicos, la HSP70 puede estar implicada en la reacción inmunológica cruzada entre estos parásitos