Validación de un ensayo tipo ELISA para la cuantificación de anticuerpos contra el polisacárido capsular de Haemophilus influenzae tipo b / Validation of an ELISA assay for the quantification of antibodies against Haemophilus influenzae type b capsular polysaccharide

RESUMEN

Se llevó a cabo el estudio de validación de un ensayo tipo ELISA —aceptado internacionalmente para este propósito—, con el objetivo de disponer de un método para la cuantificación de anticuerpos contra el polisacárido capsular de Haemophilus influenzae tipo b (Hib), en los ensayos clínicos previstos para demostrar la inmunogenicidad de una nueva vacuna conjugada, compuesta por un antígeno sintético. La validación fue conducida en el Laboratorio Nacional de Referencia para Haemophilus, en el Instituto de Medicina Tropical “Pedro Kourí”, La Habana, Cuba, y se diseñó para ello un protocolo en el cual se consideró la determinación de la precisión, exactitud, linealidad y límite de detección del ensayo. En la preparación de la curva patrón estándar se empleó el suero de referencia internacional Hib Lote 1983. Para la repetibilidad y reproducibilidad del sistema se observaron índices de dispersión inferiores a 10 y 20 por ciento, respectivamente. El límite de detección fue de 3,6 ng/m, y los ensayos de recuperación y linealidad revelaron la alta exactitud del método. Se concluyó que durante la evaluación clínica del candidato a vacuna, obtenido por síntesis química, la cuantificación de anticuerpos contra el polisacárido capsular de Hib podía ser afrontada con apropiada precisión y exactitud mediante el método propuesto